5. Operating the Instrument
2016-04
IFU for Infinite 200 PRO No. 30052730 Rev. No. 1.6
101
5.6.8
Calculation of Fluorescence Polarization Parameters
G-Factor:
)
)(
1
(
)
)(
1
(
par
buf
par
ref
ref
cross
buf
cross
ref
ref
RFU
RFU
P
RFU
RFU
P
G
−
−
−
+
=
[ ]
buffer
of
units
ce
fluorescen
relative
Averaged
RFU
reference
of
units
ce
fluorescen
relative
Averaged
RFU
reference
of
value
on
Polarizati
P
buf
ref
ref
...
...
P
...
Blank Reduction:
The mean value of the respective blank wells is subtracted from each value.
well
each
for
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
par
blk
par
blk
par
blk
par
smp
par
buf
par
buf
par
buf
par
ref
par
−
−
−
−
=
∆
well
each
for
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
RFU
cross
blk
cross
blk
cross
blk
cross
smp
cross
buf
cross
buf
cross
buf
cross
ref
cross
−
−
−
−
=
∆
Intensities:
Parallel and perpendicular intensities are calculated using the following formulas:
par
par
RFU
G
I
∆
=
*
cross
cross
RFU
I
∆
=
Polarization:
cross
par
cross
par
I
I
I
I
P
+
−
=
Anisotropy:
cross
par
cross
par
I
I
I
I
A
*
2
+
−
=
Total Intensity:
cross
par
tot
I
I
I
*
2
+
=
