B59380–AD
92 of 135
Образцы следует хранить при комнатной температуре (18 – 25°C), не встряхивая. Перед забором аликвоты
для исследования образец следует перемешать путем легкого встряхивания пробирки, чтобы обеспечить
однородное распределение клеток по объему.
Образцы подлежат анализу в течение 24часов после венепункции.
ОТМЫТЫЕ ОБРАЗЦЫ
Если образцы предстоит подвергать отмывке перед окрашиванием и лизисом эритроцитов, важно удалить
весь супернатант после последнего центрифугирования.
Избыток буфера для отмывки в пробирке с
осадком клеток может снизить эффективность реактива VersaLyse.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Концентрация лейкоцитов в образце должна быть менее 10
4
клеток / мкл (10
10
/л). При необходимости
образец разводят ФСБ, доводя концентрацию лейкоцитов до 5 x 10
3
клеток / мкл (5 x 10
9
/л).
Концентрация эритроцитов в образце должна быть менее 6 x 10
6
/мкл (6 x 10
12
/л), поэтому рекомендуется
разводить образец ФСБ, чтобы довести концентрацию эритроцитов до 5 x 10
6
/мкл.
Если требуется довести до нужного уровня обе концентрации (эритроцитов и лейкоцитов), воспользуйтесь
более высоким разведением.
Для описанных ниже процедур объем образца (неразведенного или
предварительно разведенного) на одну пробирку составляет 100 мкл.
ПРИЗНАКИ ПОРЧИ
Любое изменение физического внешнего вида реактивов может быть признаком их распада.
Такие
реактивы не следует использовать.
В случае серьезного повреждения упаковки, или в случае несоответствия полученных результатов
аналитическим характеристикам обратитесь, пожалуйста, к нашим специалистам:
e-mail : [email protected]
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, КОТОРЫЕ НЕ ВХОДЯТ В НАБОР
•
Пробирки для образцов и материалы для забора образцов.
•
Автоматические пипетки и одноразовые наконечники вместимостью 10, 20, 100 и 1 000 мкл.
•
Пластиковые пробирки для гемолиза.
•
Калибровочные микросферы: Флуоросферы Flow-Set Fluorospheres (Ref. 6607007).
•
Специфические флуоресцирующие антитела.
•
Изотипические контроли.
•
Буфер (ФСБ: 0,01 М фосфат натрия; 0,145 М хлорид натрия; pH 7,2).
•
Фиксирующий реактив: например, IOTest 3 Fixative Solution (Ref. A07800).
•
Центрифуга.
•
Автоматический встряхиватель (типа Vortex).
•
Проточный цитометр.
ПРОЦЕДУРА с РЕАГЕНТОМ VERSALYSE
Примечание:
Описанная ниже процедура действительна для стандартных приложений.
Для ряда
приложений Beckman Coulter объемы образца и реактива VersaLyse могут различаться. В таких случаях
необходимо следовать инструкциям, приведенным в описании приложения.
А – Процедура без одновременной фиксации
Приготовление реактива
Реактив не требует приготовления. Используйте VersaLyse непосредственно из оригинального флакона.
Для каждого анализируемого образца помимо тест-пробирки необходимо иметь контрольную пробирку,
в которой клетки образца смешивают с изотипическим контролем, соответствующим выбранному
специфическому реактиву для окрашивания.
1. В каждую тест-пробирку вносят антитело в количестве, рекомендованном производителем для
окрашивания 5 x 10
5
лейкоцитов.
2. В каждую контрольную пробирку вносят изотипический контроль в количестве, рекомендованном
производителем для окрашивания 5 x 10
5
лейкоцитов.