B59380–AD
37 of 135
Specifikationer
VersaLyse Lysing Solution Ready-for-use
Formulering
Væske
Bind
100 mL
Antal hætteglas
1 hætteglas
Volumen pr. test
1 mL (brugsklar når anvendt uden samtidig fiksering)
VersaLyse
Lyseringsopløsning
1 mL / test, A09777 100 tests; 100 mL
Til
In Vitro
diagnostisk brug
TILSIGTET BRUG
Dette reagens er beregnet til lysering af erytrocytter ved klargøring af biologiske prøver til flowcytometrisk analyse.
VersaLyse er kompatibelt med alle typer cytometre og anvendes med eller uden vask after inkubationen, så længe
der anvendes korrekt kalibrerede fluorescerende antistoffer i protokollen. VersaLyse gør det ligeledes muligt at
behandle prøver, selv om disse er blevet vasket tidligere med henblik på elimination af serumimmunoglobuliner
for eksempel (1,2,3,4,5).
PRINCIP
Prøven, der indeholder erytrocytterne, der skal lyseres, eksponeres mod VersaLyse-reagenset i mindst 10
minutter. Den væsentligste aktive bestanddel i VersaLyse er en cyklisk amin, som, når den kommer i kontakt med
karbonanhydrase til stede i erytrocytterne, omdannes til en forbindelse, der er kraftigt lyserende for disse celler.
Reagenset anvendes sammen med specifikt konjugerede antistoffer, der er i stand til at binde sig til leukocytter på
grund af de antigendeterminanter, som disse udtrykker. Den specifikke farvning af leukocytter opnås ved inkubation
af prøven med antistoffet eller antistofferne. Erytrocytterne fjernes derefter ved lysering, og leukocytterne, som ikke
påvirkes af denne proces, analyseres ved flowcytometri.
Prøvepræparationerne skal opbevares mellem 2 og 8 °C og analyseres hurtigt ved anvendelse af flowcytometri.
Hvis analysen forsinkes i adskillige timer, skal præparaterne fikseres med PBS indeholdende 0,1% formaldehyd
(se den tekniske indlægsseddel i IOTest 3 Fixative Solution – Ref. A07800 – for at fremstille PBS med 0,1%
formaldehyd). I sådanne tilfælde er forudgående vask nødvendig.
Flowcytometret måler lysdiffusion og cellernes fluorescens. Dette gør det muligt at afgrænse den interessante
population inden for et elektronisk vindue defineret på et histogram, som korrelerer den orthogonale lysdiffusion
(Side Scatter eller SS) diffusionen af snævervinklet lys (Forward Scatter eller FS). Andre histogrammer, der
kombinerer to af de forskellige parametre tilgængelige på cytometret, kan anvendes som hjælp i gating-stadiet
afhængigt af den af brugeren valgte applikation.
Fluorescensen af de afgrænsede celler analyseres men henblik på at skelne de positivt farvede hændelser
fra ufarvede hændelser.
Resultaterne udtrykkes som procentandelen af positive hændelser i forhold til alle
hændelserne opnået ved gatingen.
ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER
1. Anvend ikke reagenset efter udløbsdatoen.
2. Opbevar ikke i køleskab. Må ikke fryses.
3. Minimer eksponering mod lys under inkubation med fluorescerende antistoffer.
4. Undgå mikrobiel kontaminering af reagenset, da der i så fald kan opstå fejlagtige resultater.
5. Formaldehyd er giftigt og allergent. Det menes af være carcinogent. Pipettér aldrig med munden og undgå
al kontakt med hud, slimhinder, øjne og tøjet.
6. Alle blodprøver skal betragtes som potentielt smittefarlige og skal håndteres med forsigtighed (navnlig: bær
handsker, kittel og beskyttelsesbriller).
7. Prøverør med blod og engangsmaterialer anvendt under håndteringen skal bortskaffes i særlige beholdere
beregnet til affaldsforbrænding.