B59380–AD
129 of 135
ПРОМИТІ ЗРАЗКИ
Якщо вам необхідно промити зразки перед фарбуванням з подальшим лізисом еритроцитів, важливо
видалити весь супернатант після останнього центрифугування. Надлишок промивного буфера в осаді
клітин може знизити ефективність VersaLyse.
ПІДГОТОВКА ЗРАЗКІВ
Концентрація лейкоцитів в зразку не має перевищувати значення 10
4
клітин/мкл (10
10
/л). За необхідності
розведіть зразок за допомогою буферного розчину ФСБ для доведення концентрації лейкоцитів до значення
5 x 10
3
/мкл (5 x 10
9
/л).
Концентрація еритроцитів в зразку повинна бути меншою, ніж 6 x 10
6
/мкл (6 x 10
12
/л), рекомендується
розбавляти зразок у ФСБ, щоб довести концентрацію еритроцитів до 5 x 10
6
/мкл.
Якщо необхідно скоригувати концентрації лейкоцитів та еритроцитів, слід застосовувати найбільший
рівень розведення. Під час проведення процедури використовують 100 мкл попередньо нерозведеного або
попередньо розведеного зразка на пробірку.
ОЗНАКИ ПСУВАННЯ
Будь-яка зміна зовнішнього вигляду реагентів може вказувати на псування,
і реагент не слід
використовувати.
У разі пошкодження упаковки, або якщо отримані дані показують деякі зміни в робочих характеристиках,
зверніться до місцевого дистриб’ютора або скористайтеся цією адресою електронної пошти:
НЕОБХІДНІ МАТЕРІАЛИ, ЩО НЕ ВХОДЯТЬ У КОМПЛЕКТ
•
Пробірки для зразків і матеріали, необхідні для забору зразків.
•
Автоматичні піпетки з одноразовими наконечниками на 10, 20, 100 та 1000 мкл.
•
Пластикові пробірки для гемолізу.
•
Калібрувальні частки: флуоросфери Flow-Set (REF 6607007).
•
Специфічні флуоресцентні антитіла.
•
Ізотипічний контроль.
•
Буфер (забуферений фосфатом фізіологічний розчин, PBS: 0,01 М фосфату натрію; 0,145 М хлориду
натрію; рН 7,2).
•
Реагент для фіксації: тобто, фіксуючий розчин IOTest 3 (Ref. A07800).
•
Центрифугування.
•
Автоматична мішалка (типу вортекса).
•
Проточний цитометр.
ПРОЦЕДУРА З РЕАГЕНТОМ VERSALYSE
Примітка. Описані нижче процедури дійсні для стандартних застосувань. Об’єми зразків та/або реагенту
VersaLyse для деяких програм Beckman Coulter можуть відрізнятися. Якщо це так, дотримуйтесь інструкцій,
що містяться в технічній інструкції програми.
A – Процедура без одночасної фіксації
Підготовка реагенту
Підготовка не потрібна. Використовуйте VersaLyse безпосередньо з флакона.
Для кожного аналізованого зразка на додаток до тестової пробірки необхідно використовувати одну
контрольну пробірку, в якій до клітин додають ізотипічний контроль відповідно до вибраного специфічного
фарбування.
1. У кожну пробірку додайте рекомендовану виробником кількість антитіл для забарвлення 5 x 10
5
лейкоцитів.
2. У кожну пробірку додайте рекомендовану виробником кількість ізотипічного контролю для забарвлення
5 x 10
5
лейкоцитів.
3. Додайте 100 мкл зразка (попередньо розведеного або обробленого іншим чином) в обидві пробірки.
Обережно перемішайте вміст пробірок у вортексі.
4. Інкубуйте відповідно до умов, встановлених у технічній інструкції для використаних антитіл.