B59380–AD
80 of 135
Špecifikácia
Lyzačný roztok VersaLyse, pripravený na použitie
Forma
Roztok
Objem
100 ml
Počet fľaštičiek
1 fľaštička
Objem / test
1 ml (pri metóde bez fixácie pripravené na priame použitie)
VersaLyse
Lyzačný roztok
1 ml / test, A09777 100 testov; 100 ml
Na diagnostické použitie
In Vitro
URČENÉ POUŽITIE
Reagencia je určená na lýzu červených krviniek v biologických vzorkách pripravených na analýzu na prietokovom
cytometri. VersaLyse je možné používať na všetkých typoch prietokových cytometrov pri technikách s premývaním
aj bez premývania vzorky po inkubácii, za predpokladu, že sa použijú riadne kalibrované fluorescenčne značené
protilátky. VersaLyse tiež umožňuje spracovať vzorky, ktoré už boli v predchádzajúcom spracovaní premyté, napr.
z dôvodu odstránenia sérových imunoglobulínov (1,2,3,4,5).
PRINCÍP
Vzorka, ktorá obsahuje červené krvinky a má byť lyzovaná, je vystavená minimálne na 10 minút pôsobeniu roztoku
VersaLyse. Hlavnou aktívnou zložkou VersaLyse je cyklický amín, ktorý je kontaktom s karbonátom dehydratázou
červených krviniek premenený na látku veľmi účinne lyzujúce erytrocyty.
Táto reagencia sa používa v kombinácii so špecifickými konjugovanými protilátkami, ktoré sú schopné viazať sa
na antigénne determinanty exprimované na leukocytoch. K špecifickému značeniu leukocytov pomocou protilátok
dochádza v priebehu inkubácie vzorky s protilátkou (protilátkami). Červené krvinky sú zo vzorky odstránené lýzou
a leukocyty, ktoré lýzou nie sú ovplyvnené, sú analyzované na prietokovom cytometri.
Pripravené vzorky musia byť skladované pri teplote 2 až 8 °C a rýchlo analyzované na prietokovom cytometri. V
prípade niekoľkohodinového odkladu pred analýzou je možné ich fixovať v PBS obsahujúcom 0,1 % formaldehydu
(návod, ako pripraviť PBS s 0,1 % formaldehydom - viď príbalový leták fixačného roztoku IOTest 3 - Ref. A07800).
V tomto prípade je premytie vzorky pred analýzou nevyhnutné.
Prietokový cytometer meria rozptyl svetla a fluorescenciu buniek. Podľa týchto parametrov sú bunky lokalizované
vo vnútri elektronicky vytvoreného okna definovaného histogramom, ktorý koreluje kolmý rozptyl svetla ("Side
Scatter", SS) a rozptyl svetla v malom uhle ("Forward Scatter", FS). Ďalšie histogramy, kombinujúce dva rôzne
parametre dostupné na cytometri, je možné využiť pri elektronickom výbere populácie buniek ("gatovaní") v
závislosti na užívateľom zvolenej aplikácii.
Fluorescenco razmejenih celic analiziramo z namenom razlikovanja med pozitivno obarvanimi dogodki in tistimi,
ki niso obarvani. Výsledok je vyjadrený ako percentuálne zastúpenie pozitívnych častíc vo vzťahu ku všetkým
časticiam vybratým pri elektronickom "gatovaní".
VÝSTRAHA A OPATRENIA
1. Nepoužívajte reagenciu po dátume exspirácie.
2. Neskladujte v chladničke, nezamrazujte.
3. V priebehu inkubácie s fluorescenčne značenými protilátkami obmedzte pôsobenie svetla na minimum.
4. Vyvarujte sa mikrobiálnej kontaminácie reagencie, ktorá môže byť príčinou chybných výsledkov
5. Formaldehyd je toxický a alergénny. Je považovaný za látku s karcinogénnymi účinkami. Nikdy nepipetujte
ústami a vyvarujte sa akéhokoľvek kontaktu reagencie s pokožkou, sliznicami, očami a odevom.
6. Všetky vzorky krvi sa musia považovať za potenciálne infekčné a pri zaobchádzaní snimi je treba dodržovať
zásady bezpečnosti práce (hlavne používať osobné ochranné pomôcky: rukavice, plášť a okuliare).
7. Skúmavky s krvou a použitý jednorazový materiál je potrebné likvidovať spálením v špeciálnych kontajneroch.