B59380–AD
122 of 135
Specifikācijas
Lietošanai gatavs VersaLyse lizēšanas šķīdums
Formulēšana
Šķidrums
Tilpums
100 ml
Flakonu skaits
1 flakons
Tilpums testā
1 ml (gatavs lietošanai, ja netiek izmantots ar vienlaikus fiksāciju)
VersaLyse
lizēšanas šķīdums
.
1 ml/testā, A09777
100 testi; 100 ml
In vitro
diagnostikas lietošanai
PAREDZĒTĀ LIETOŠANA
Šis reaģents ir paredzēts sarkano asinsķermenīšu lizēšanai, gatavojot bioloģiskos paraugus analizēšanai ar plūsmas
citometrijas metodi. VersaLyse šķīdums ir saderīgs ar visiem citometru tipiem un tiek izmantots gan gadījumos, kad
pēc inkubācijas tiek veikta skalošana, gan bez tās, ja vien protokolā tiek izmantotas pareizi kalibrētas fluorescējošās
antivielas. Izmantojot VersaLyse, ir iespējams apstrādāt paraugus pat tad, ja tie ir iepriekš skaloti, eliminējot seruma
imūnglobulīnus, piemēram, (1,2,3,4,5).
PRINCIPS
Paraugs ar lizēšanai paredzētajiem sarkanajiem asinsķermenīšiem tiek pakļauts VersaLyse reaģenta iedarbībai vismaz
10 minūtes. VersaLyse svarīgākā aktīvā viela ir ciklisks amīns, kas, nokļūstot saskarsmē ar oglekļa anhidrāzi sarkanajos
asinsķermenīšos, tiek pārveidots par savienojumu, kam ir augsta lizēšanas iedarbība šajās šūnās.
Šo reaģentu izmanto ar konkrētām konjugētām antivielām, kas var piesaistīties leikocītiem savu izdalīto antigēno
determinantu dēļ. Vispirms tiek veikta specifiska leikocītu iekrāsošana, inkubējot paraugu ar antivielu vai antivielām.
Pēc tam eritrocīti tiek atdalīti lizēšanas procesā, un leikocīti, ko šis process neietekmē, tiek analizēti, izmantojot plūsmas
citometriju.
Sagataves ir jāuzglabā 2–8 °C temperatūrā un strauji jāanalizē, izmantojot plūsmas citometriju. Ja pirms analizēšanas
notiek dažu stundu kavēšanās, sagataves var fiksēt ar PBS, kurā ir 0,1 % formaldehīda (skatīt IOTest 3 fiksatīvā šķīduma —
REF A07800 — tehnisko lietošanas instrukciju šī PBS sagatavošanai ar 0,1 % formaldehīda). Šajā gadījumā ir nepieciešama
iepriekšēja skalošana.
Plūsmas citometrs mēra gaismas difūziju un šūnu fluorescenci. Tādēļ ir iespējama interesējošās populācijas ierobežošana
elektroniskajā logā, kas definēts histogrammā, kas korelē ar gaismas ortogonālo difūziju (sānu izkliedi jeb SS) un
šaurleņķa gaismas difūziju (priekšējā izkliede jeb FS). Kā papildu metodes sinhronizācijas procesā iespējams izmantot
citas histogrammas, kurās iespējams kombinēt divus dažādus citometrā pieejamos parametrus atkarībā no lietotāja
izvēlētā pielietojuma.
Tiek analizēta atdalīto šūnu fluorescence, lai atšķirtu pozitīvi iekrāsotos gadījumus no neiekrāsotajiem. Rezultāti tiek
izteikti kā procentuālais lielums no pozitīviem gadījumiem attiecībā pret visiem gadījumiem, kas iegūti selekcijā.
BRĪDINĀJUMI UN PIESARDZĪBAS PASĀKUMI
1. Neizmantojiet reaģentu pēc derīguma termiņa beigām.
2. Nedrīkst uzglabāt ledusskapī un sasaldēt.
3. Inkubējot ar fluorescējošām antivielām, gaismas ietekmei jābūt minimālai.
4. Izvairieties no reaģentu bakteriālas kontaminācijas, jo iespējami viltus rezultāti.
5. Formaldehīds ir toksisks un alergēns. Tas tiek uzskatīts par kancerogēnu vielu. Muti nedrīkst izmantot pipetes vietā.
Izvairieties no saskarsmes ar ādu, gļotādu, acīm un drēbēm.
6. Visi asins paraugi ir jāuzskata par potenciāli infekcioziem, un ar tiem jādarbojas uzmanīgi (tas ir, jālieto aizsargcimdi,
aizsargtērpi un brilles).
7. Darbā izmantotās asiņu mēģenes un vienreizlietojamie materiāli ir jāutilizē ad hoc konteineros, kas paredzēti
sadedzināšanai.