B59380–AD
127 of 135
Специфікації
Готовий до використання розчин для лізису VersaLyse
Приготування
препарату
Рідина
Об'єм
100 мл
Кількість флаконів
1 флакон
Об'єм, необхідний
для проведення
тесту
1 мл (готовий до застосування при використанні без одночасної
фіксації)
Розчин для лізису VersaLyse
Розчин для лізису
.
1 мл/тест, A09777
100 тестів; 100 мл
Для діагностики
in vitro
.
ПРИЗНАЧЕННЯ
Цей реагент призначений для лізису еритроцитів під час підготування біологічних зразків для аналізу
за допомогою проточної цитометрії. VersaLyse сумісний з усіма типами цитометрів і використовується з
промиванням або без нього після інкубації, доки в протоколі використовуються відкалібровані належним
чином флуоресцентні антитіла. VersaLyse також надає можливість обробляти зразки навіть тоді, коли вони
були промиті раніше, з метою виключення, тобто, сироваткових імуноглобулінів (1,2,3,4,5).
ПРИНЦИП ДІЇ
Зразок, що містить еритроцити та має пройти процедуру лізису, піддають дії реагенту VersaLyse
щонайменше протягом 10 хвилин. Основним активним інгредієнтом VersaLyse є циклічний амін, який,
контактуючи з карбоангідразою, присутньою в еритроцитах, перетворюється на сполуку з високою
здатністю до лізису цих клітин.
Цей реагент використовується з специфічно кон’югованими антитілами,
здатними зв’язуватися з
лейкоцитами завдяки антигенним детермінантам, які вони експресують.
Специфічне фарбування
лейкоцитів досягається інкубацією зразка з антитілом або антитілами.
Еритроцити потім видаляють
шляхом лізису, а лейкоцити, на які не впливає цей процес, досліджують методом проточної цитометрії.
Препарати слід зберігати при температурі від 2 до 8°С та швидко аналізувати з використанням проточної
цитометрії. У випадку затримки протягом декількох годин до аналізу вони можуть бути зафіксовані за
допомогою ФСБ, що містить 0,1% формальдегід (див.
технічну інструкцію з використання фіксуючого
розчину IOTest 3 – Ref. A07800 – для підготовки цього ФСБ з 0,1% формальдегідом). У цьому випадку
необхідне попереднє промивання.
Проточний цитометр вимірює розсіювання світла та флуоресценцію клітин.
Це робить можливим
розмежування досліджуваної популяції всередині електронного вікна, що визначається на гістограмі, яка
співвідносить ортогональне розсіювання світла (бічне розсіювання або SS) і вузькокутове розсіювання
світла (пряме розсіювання або FS). Інші гістограми, що поєднують два різні параметри, доступні на
цитометрі, можна використовувати для допомоги на етапі гейтування залежно від програми, вибраної
користувачем.
Флуоресценція обмеженої популяції клітин аналізується, щоб розрізнити події з позитивно забарвленими
клітинами і незабарвленими. Результати виражаються як відсоток позитивних подій відносно всіх подій,
зареєстрованих при встановлених гейтах.
ПОПЕРЕДЖЕННЯ Й ЗАСТЕРЕЖЕННЯ
1. Не використовуйте реагенти після закінчення терміну придатності.
2. Не зберігайте у холодильнику, не заморожуйте.
3. Мінімізуйте вплив світла під час інкубації з флуоресцентними антитілами.
4. Уникайте мікробної контамінації реагентів, інакше може бути отримано помилкові результати.
5. Формальдегід токсичний і може викликати алергію. Вважається, що він канцерогенний. Ніколи не
піпетуйте ротом і уникайте контакту зі шкірою, слизовими оболонками, очима та одягом.