B59380–AD
101 of 135
Specifikacije
Otopina VersaLyse za liziranje spremna za upotrebu
Oblik
Tekućina
Volumen
100 mL
Broj bočica
1 bočice
Volumen po testiranju 1 mL (spremno za upotrebu kada se koristi bez istovremene fiksacije)
Otopina za liziranje
Otopina za liziranje
1 mL / testu, A09777 100 testiranja;
100 mL
Za
In vitro
dijagnostiku
NAMJENA
Ovaj reagens namijenjen je liziranju crvenih krvnih stanica u pripravcima bioloških uzoraka za analizu protočnom
citometrijom. VersaLyse je kompatibilna sa svim vrstama citometra i koristi se sa ili bez ispiranja nakon inkubacije,
tako dugo dok se prikladno kalibrirana fluorescentna antitijela koriste u protokolu. VersaLyse također omogućuje
tretiranje uzoraka čak kada su oni isprani ranije, s ciljem npr. eliminacije serumskih imunoglobulina (1,2,3,4,5).
NAČELO
Uzorak koji sadrži crvene krvne stanice koje će se lizirati izložen je VersaLyse reagensu najmanje 10 minuta.
Glavni aktivni sastojak VersaLyse je ciklički amin koji se u kontaktu s ugljikovom anhidrazom prisutnom u crvenim
krvnim stanicama transformira u sastojak koji je vrlo lizirajući za ove stanice.
Ovaj se reagens koristi sa specifičnim konjugiranim antitijelima koja se mogu vezati na leukocite zbog antigenskih
determinanti koje ona izražavaju. Specifično bojenje leukocita postiže se inkubiranjem uzorka s antitijelom ili
antitijelima. Crvene krvne stanice zatim se uklanjaju lizom, a leukociti na koje ne utječe ovaj postupak, analiziraju
se protočnom citometrijom.
Pripravci se moraju čuvati između 2 i 8 °C i brzo analizirati protočnom citometrijom. U slučaju odgode od nekoliko
sati prije analize, oni se mogu fiksirati s PBS koja sadrži 0,1 % formaldehida (pogledajte tehničke upute IOTest 3
fiksacijske otopine – Ref. A07800 – za pripremu ove PBS sa 0,1 % formaldehida).
U ovom je slučaju potrebno prethodno ispiranje. Protočni citometar mjeri difuziju svjetla i fluorescenciju stanica.
To omogućuje razlikovanje interesne populacije unutar elektroničnog prozora definiranog na histogramu, koji
uspoređuje ortogonalnu difuziju svjetla (zrnatost ili SS) i difuziju svjetlosti pod malim kutom (veličinu ili FS). Drugi
histogrami kombiniraju dva različita parametra dostupna na citometru koja se mogu koristiti kao potpora u fazi
ograđivanja stanične populacije ovisno o aplikaciji koju je odabrao korisnik.
Fluorescencija razgraničenih stanica analizirana je s ciljem razlikovanja pozitivno obojanih događaja od neobojanih.
Rezultati su izraženi kao postotak pozitivnih događaja u odnosu na sve događaje dobivene ograđivanjem stanične
populacije.
UPOZORENJE I MJERE OPREZA
1. Ne koristite reagens nakon isteka roka trajnosti.
2. Ne èuvati u hladnjaku, ne zamrzavati.
3. Minimalizirati izlaganje svjetlu tijekom inkubacije s fluorescentnim antitijelima.
4. Prije upotrebe sačekajte da se ugrije do sobne temperature (18 - 25 °C).
5. Formaldehid je alergen i toksièan je. Za njega se smatra da je kancerogen. Nikada nemojte pipetirati ustima
te izbjegavajte kontakt s kožom, sluznicama, oèima i odjeæom.
6. Svi uzorci krvi moraju se smatrati potencijalno zarazni pa je s njima potrebno postupati oprezno (uvijek koristiti
zaštitne rukavice, kute i naočale).
7. Epruvete s krvi i potrošni materijal odlažite u ad hoc spremnike predviđene za spaljivanje.