B60231–AE
102 of 128
Таблица (ниже):
Пример статистики, полученный с пробиркой TROL 45/34/7-AAD на программном обеспечении System II, с
использованием функции CAL FACTOR (Коэффициент калибровки), где:
•
1024 — аналитическая концентрация Stem-Count Fluorospheres.
•
5248 — общее количество флуоросфер, накопленных в регионе CAL (Калибровка) в течение всего
времени сбора.
В этом примере все подсчеты скорректированы на число: 1024/5248.
Статистика: не
нормализованная
гистология
Перечень регионов
селекции: код
отключенного
региона
Скорректированный
подсчет
(клеток/мкл)
1
A
LEUKS
9 798
2
B
CD34 POS
279
3
C
CD45 DIM
264
4
D
Stem-Trol Control
Cells
248
7
G
CAL 1024
1 024
5
H
Все Stem-Count
Fluorospheres
1 046
1. Запишите скорректированные значения абсолютного количества (клеток/мкл) в регионах D от пробирок
TROL 45/34/7-AAD.
.
Пример:
.
Пробирка TROL 45/34/7-AAD: контрольные клетки Stem-Trol Control Cells = 248 клеток/мкл.
2. Умножьте это точное число на коэффициент нормализации (N) = 5.
.
ЗАМЕЧАНИЕ:
.
Необходимо нормализовать абсолютное количество контрольных клеток Stem-Trol Control Cells относительно
добавленных объемов во время теста: определите N путем деления объема справочных данных подсчета
(синглетов Stem-Count Fluorospheres) на объем контрольных клеток Stem-Trol Control Cells, добавленных в
тестовую пробирку.
.
..
Пример:
.
100 мкл Stem-Count Fluorospheres добавлены к 20 мкл контрольных клеток Stem-Trol Control Cells:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Нормализованное абсолютное количество контрольных клеток Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1240 клеток/мкл.
3. Проверьте абсолютное количество контрольных клеток Stem-Trol Control Cells, полученное путем
сравнения с контрольными клетками Stem-Trol Control Cells.
Аналитическая концентрация (клеток/мкл), указанная на этикетке флакона. Полученное абсолютное
количество контрольных клеток Stem-Trol Control Cells должно находиться в пределах ±15% от
аналитической концентрации Stem-Trol Control Cells.
Теперь валидованы метод окрашивания и
процесс лизирования.
.
Пример:
.
Аналитическая концентрация контрольных клеток Stem-Trol Control Cells = 1380 клеток/мкл.
.
Диапазон приемлемых значений: 1173–1587 (1380 ± 207) клеток/мкл
.
Нормализованное абсолютное число = 1240 клеток/мкл находится в пределах диапазона.
.
..
ВАЖНО:
.
Если абсолютное количество контрольных клеток Stem-Trol Control Cells выходит за пределы диапазона
приемлемых значений, определите, правильно ли выполнено пипетирование, особенно для Stem-Count или
Flow-Count Fluorospheres и контрольных клеток Stem-Trol Control Cells. Визуально проверьте отчеты проточной
