B60231–AE
116 of 128
Ja iegūst vismaz 1000 fluorosfēras singletus, tad absolūtais CD34
+
Stem-Trol kontroles šūnu skaits tiek automātiski
noregulēts, un to var iegūt tieši no D reģiona statistikas izdruku rezultātiem.
Tabula (tālāk)
Piemērs statistikai, kas iegūta ar stobriņu TROL 45/34/7-AAD programmatūrā System II, izmantojot funkciju CAL FACTOR,
kur:
• 1024 ir Stem-Count fluorosfēru testētā koncentrācija.
• 5248 ir kopējais CAL reģionā uzkrāto fluoresfēru skaits visā uzkrāšanās laikā.
Šajā piemērā visu skaitu korekcijai tika izmantota vērtība 1024/5248.
Statistika: nav
normalizēts Hist režīms
Listgating (saraksta
atsijāšana): atspējota
reģiona ID
Koriģētie skaiti
(šūnas/µl)
1
A
LEUKS
9798
2
B
CD34 POS
279
3
C
CD45 DIM
264
4
D
Stem-Trol Control Cells
248
7
G
CAL 1024
1024
5
H
Visas Stem-Count
fluorosfēras
1046
1. Ierakstiet pielāgotos absolūtos skaitļus (šūnas/µl) D reģionos no stobriņiem TROL 45/34/7-AAD.
.
Piemērs.
.
Stobriņš TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol kontroles šūnas = 248 šūnas/µl.
2. Reiziniet šo precīzo skaitu ar normalizācijas koeficientu (N) = 5.
.
PIEZĪME.
.
Ir nepieciešams normalizēt Stem-Trol kontroles šūnu absolūto skaitu, ņemot vērā testa laikā pievienoto tilpumu: nosakiet N, dalot
skaitīšanas atskaites tilpumu (Stem-Count fluorosfēru singleti) ar stobriņam pievienoto Stem-Trol kontroles šūnu tilpumu.
.
..
Piemērs.
.
20 µl Stem-Trol kontroles šūnām pievieno 100 µl Stem-Count fluorosfēru:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Normalizētais Stem-Trol kontroles šūnu absolūtais skaits = 248 x 5 = 1240 šūnas/µl.
3. Pārbaudiet Stem-Trol kontroles šūnu absolūto skaitu, kas iegūts, salīdzinot ar Stem-Trol kontroles šūnām.
Testētā koncentrācija (šūnas/µl), kas norādīta uz flakona etiķetes. Stem-Trol kontroles šūnu absolūtais skaits nedrīkst
pārsniegt ±15 % no Stem-Trol kontroles šūnu testētās koncentrācijas. Krāsošanas metode un līzēšanas process tagad
ir validēti.
.
Piemērs.
.
Stem-Trol kontroles šūnu testētā koncentrācija = 1380 šūnas/µl.
.
Pieņemamo vērtību diapazons: 1173–1587 (1380 ± 207) šūnas/µl
.
Normalizētais absolūtais skaitlis = 1240 šūnas/µl atrodas diapazonā.
.
..
SVARĪGI!
.
Ja Stem-Trol kontroles šūnu absolūtais skaits neietilpst pieņemto vērtību diapazonā, noskaidrojiet, vai pipetēšana ir veikta pareizi,
jo īpaši attiecībā uz Stem-Count vai Flow-Count fluorosfērām un Stem-Trol kontroles šūnām. Vizuāli pārbaudiet plūsmas citometra
pārskatus un krāsošanas un līzēšanas procesa kvalitāti jūsu testa stobriņos. Pārbaudiet, kā tika iestatītas reģiona robežas. Ja
nepieciešams, atkārtojiet sagatavošanu ar jauniem testa stobriņiem. Iegūstiet un analizējiet gan jauno, gan iepriekšējo stobriņu
sēriju. Salīdziniet abus rezultātus. Ja tie nesakrīt, sazinieties ar vietējo Beckman Coulter pārstāvi.
PREČU ZĪMES
Beckman Coulter, stilizētais logotips un Beckman Coulter preču un pakalpojumu zīmes, kas minētas šeit, ir
Beckman Coulter, Inc. reģistrētas preču zīmes vai preču zīmes Amerikas Savienotajās Valstīs un citās valstīs.
