B60231–AE
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Estatísticas:
histograma não
normalizado
Delimitação de
lista: ID de região
desativado
Contagens
ajustadas
(células/µL)
7
G
CAL 1024
1024
5
H
Todas as Stem-Count
Fluorospheres
1046
1. Registe as contagens absolutas ajustadas (células/µL) em Regiões D de tubos de amostra TROL
45/34/7-AAD.
.
Exemplo:
.
Tubo de amostra TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 células/µL.
2. Multiplique esta contagem precisa pelo fator de normalização (N) = 5.
.
NOTA:
.
É necessário normalizar a contagem absoluta de Stem-Trol Control Cells em função dos volumes adicionados durante o
teste: determine o valor N dividindo o volume da referência de contagem (singletos de Stem-Count Fluorospheres) pelo
volume de Stem-Trol Control Cells adicionadas ao tubo de ensaio.
.
..
Exemplo:
.
são adicionados 100 µL de Stem-Count Fluorospheres a 20 µL de Stem-Trol Control Cells:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Contagem absoluta de Stem-Trol Control Cells normalizada = 248 x 5 = 1240 células/µL.
3. Verifique a contagem absoluta de Stem-Trol Control Cells obtida ao compará-la com a
concentração ensaiada de Stem-Trol Control Cells (células/µL) indicada no rótulo do respetivo recipiente. A
contagem absoluta de Stem-Trol Control Cells obtida deve situar-se em ±15% da concentração ensaiada de
Stem-Trol Control Cells. O método de coloração e o processo de lise estão agora validados.
.
Exemplo:
.
Concentração ensaiada de Stem-Trol Control Cells = 1380 células/µL.
.
Intervalo de valores aceites: 1173–1587 (1380 ± 207) células/µL
.
A contagem absoluta normalizada = 1240 células/µL está dentro do intervalo.
.
..
IMPORTANTE:
.
Se a contagem absoluta de Stem-Trol Control Cells se situar fora do intervalo de valores aceites, determine se a
pipetagem foi realizada corretamente, especialmente de Stem-Count Fluorospheres ou Flow-Count Fluorospheres e
Stem-Trol Control Cells. Verifique visualmente os relatórios do citómetro de fluxo e a qualidade da coloração e do
processo de lise nos tubos de ensaio. Verifique a forma como os limites de região foram definidos. Se necessário, repita a
preparação com novos tubos de ensaio. Adquira e analise as séries de tubos de amostra nova e anterior. Compare os
dois resultados. Se não houver concordância, contacte o seu representante local da Beckman Coulter.
MARCAS COMERCIAIS
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são marcas comerciais ou marcas comerciais registadas da Beckman Coulter, Inc. nos Estados Unidos e outros
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INFORMAÇÕES ADICIONAIS
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Legenda dos símbolos
O Glossário de símbolos está disponível em beckman.com/techdocs (número do documento B60062).
