B60231–AE
82 of 128
Stem-Trol Kontrolní buňky
IM3632
Pro použití při diagnostice
in vitro
URČENÉ POUŽITÍ
Stem-Trol Control Cells je produkt pro stanovenou kontrolu kvality. Slouží k imunofenotypizační analýze s použitím
reagencií monoklonálních protilátek CD45 a případně CD34 a průtokové cytometrie. Umožňuje provádění kontroly
pozitivních buněk, která se zpracovává stejně jako vzorek krve, u vzorku periferní plné krve obohacené buňkami
Stem-Trol Control Cells. Tím je umožněno ověření funkčnosti reagencie a metod použitých k obarvení cílových
buněk (tj. hematopoietických progenitorních buněk (HPC) CD34+), k lýze erytrocytů a k analýze vzorků průtokovou
cytometrií.
V případě provádění ruční analýzy naleznete úplné pokyny v příbalovém letáku k balíku Stem-Kit Reagents (REF
IM3630). Pokud používáte automatickou analýzu, vyhledejte úplné pokyny, které jsou uvedeny v příručce stemCXP
System Guide (Pokyny k systému stemCXP), dodávané se systémovým softwarem stemCXP.
SHRNUTÍ
Imunofenotypizační analýza s použitím průtokové cytometrie zahrnuje identifikaci a výčet cílových buněk
v biologických vzorcích. Před analýzou průtokovou cytometrií jsou zkoumané vzorky obarveny monoklonálními
protilátkami a erytrocyty jsou lyzovány.
Je vyžadována kontrola pozitivních buněk kvůli ověření funkčnosti
reagencie, metod přípravy vzorků a postupů při obarvování (1). Kontrola pozitivních buněk by měla být podobná
reprezentativní cílové buňce z hlediska funkčnosti pro monoklonální protilátku, lýzy erytrocytů a analýzy
průtokovou cytometrií.
Buňky Stem-Trol Control Cells tvoří kapalný preparát stabilizovaných buněk odvozených z KG-1a s exprimovaným
antigenem a zástupcem vlastností barvení CD45 a CD34 pro ty, jež se vyskytují v hematopoietických progenitorních
buňkách (HPC) CD34+.
PRINCIP
Buňky Stem-Trol Control Cells jsou uchované buňky KG-1a, které byly upraveny a stabilizovány s cílem exprimovat
epitopy CD34 třídy III (2) a společný antigen leukocytu CD45 při hustotě, která přibližně odpovídá normálním
nezralým lidským hematopoietickým buňkám. Směs buněk Stem-Trol Control Cells použitá k obohacení normální
čerstvé plné krve je nejprve obarvena reagenciemi monoklonální protilátky a barvivem pro určení životnosti buněk
7-AAD, a poté lyzována s cílem odstranit erytrocyty. Přípravek Stem-Count nebo Flow-Count Fluorospheres je
přidán s cílem přímo určit absolutní počty. Analýza průtokovou cytometrií obarveného a lyzovaného přípravku
určuje absolutní počet cílových buněk. Předpokládané výsledky se stanovují pomocí sady reagencií Stem-Kit
Reagents na validovaných a standardizovaných systémech průtokového cytometru FC 500, na kterém je
nainstalován systémový software CXP (verze 2.0) pro analýzu vzorků.
REAGENCIE
Buňky Stem-Trol Control Cells tvoří suspenzi v izotonickém roztoku obsahujícím stabilizátory a BSA. Stanovená
koncentrace buněk (buňky/µl) je odvozena z několika opakovaných analýz s použitím referenční metody. Konkrétní
hodnota je uvedena na etiketě lahvičky.
VAROVÁNÍ A OPATŘENÍ
1. Zacházejte se všemi vzorky a ostatními materiály, se kterými přicházíte do styku, tak, jako by byly možným
zdrojem infekce, a nakládejte s nimi s náležitou opatrností.
2. Nikdy nepipetujte ústy a vyvarujte se kontaktu vzorků nebo reagencií s pokožkou a sliznicemi.
3. Reagencii nepoužívejte po datu použitelnosti uvedeném na etiketě lahvičky.
4. Reagencie nemrazte.
5. Reagencii během skladování a používání nevystavujte působení zdrojů tepla.
6. Zabraňte odpařování a úniku reagencie a vždy po použití lahvičky těsně uzavřete víčkem, jinak mohou vznikat
chybné výsledky.
7. Buňky Stem-Trol Control Cells se po delší době usadí. Před použitím zajistěte kompletní resuspendování
buněk. Zabraňte nadměrnému míchání, aby nedocházelo ke vzniku vzduchových bublin. Při pipetování
nesmí do pipety vniknout vzduchové bubliny, jinak mohou být výsledky chybné.
8. Vzorky a buňky Stem-Trol Control Cells dávkujte s použitím kalibrované pipety s pozitivním nesprávným
umístěním nebo opakovací pipety, aby nedošlo k výskytu chybných výsledků.
