B60231–AE
65 of 128
1. Στην οθόνη Acquisition Run (Εκτέλεση λήψης), επιλέξτε Setup Screen >> Protocol (Πρωτόκολλο οθόνης
ρυθμίσεων).
2. Επιλέξτε Statistics (Στατιστικά στοιχεία) >> CAL FACTOR (Συντελεστής βαθμονόμησης).
3. Εισαγάγετε τον αριθμό του συντελεστή CAL (προσδιορισμένη συγκέντρωση) που αναγράφεται στο φιαλίδιο
των Stem-Count ή Flow-Count Fluorospheres.
4. Πατήστε ENTER.
5. Επιλέξτε OKAY.
6. Μόλις εμφανιστεί το σχετικό μήνυμα, πληκτρολογήστε «Y» για «ναι».
Όταν ληφθούν τουλάχιστον 1.000 μονά σφαιρίδια φθορισμού, ο απόλυτος αριθμός για CD34
+
Stem-Trol Control
Cells προσαρμόζεται αυτόματα και μπορεί να ληφθεί απευθείας από τα εκτυπωμένα αποτελέσματα στατιστικών
στοιχείων της περιοχής D.
Πίνακας (παρακάτω):
Παράδειγμα στατιστικών στοιχείων που ελήφθησαν με το σωληνάριο TROL 45/34/7-AAD στο λογισμικό System II,
με χρήση της συνάρτησης CAL FACTOR (Συντελεστής βαθμονόμησης), όπου:
•
Η προσδιορισμένη συγκέντρωση των Stem-Count Fluorospheres είναι 1.024.
•
Η τιμή 5.248 είναι ο συνολικός αριθμός σφαιριδίων φθορισμού που έχουν συσσωρευτεί στην περιοχή CAL
καθ' όλη τη διάρκεια της λήψης.
Σε αυτό το παράδειγμα, όλες οι τιμές έχουν προσαρμοστεί κατά: 1.024/5.248.
Στατιστικά
στοιχεία: Μη
κανονικοποιημένο
ιστόγραμμα
Listgating:
Αναγνωριστικό
αποκλεισμένης
περιοχής
Προσαρμοσμένες
τιμές (κύτταρα/µL)
1
A
LEUKS
9.798
2
B
CD34 POS
279
3
C
CD45 DIM
264
4
D
Stem-Trol Control
Cells
248
7
G
CAL 1024
1.024
5
H
Όλα τα Stem-Count
Fluorospheres
1.046
1. Καταγράψτε τους προσαρμοσμένους απόλυτους αριθμούς (κύτταρα/µL) στις περιοχές D από τα σωληνάρια
TROL 45/34/7-AAD.
.
Παράδειγμα:
.
Σωληνάριο TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 κύτταρα/µL.
2. Πολλαπλασιάστε αυτήν ακριβώς την τιμή με τον συντελεστή κανονικοποίησης (N) = 5.
.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ:
.
Είναι αναγκαία η κανονικοποίηση του απόλυτου αριθμού των Stem-Trol Control Cells σε σχέση με τους προστεθειμένους
όγκους κατά τη διάρκεια της εξέτασης: Προσδιορίστε την τιμή του N διαιρώντας τον όγκο της τιμής αναφοράς καταμέτρησης
(μονά Stem-Count Fluorospheres) με τον όγκο του Stem-Trol Control Cells που προστέθηκε στο δοκιμαστικό σωληνάριο.
.
..
Παράδειγμα:
.
Προστίθενται 100 µL Stem-Count Fluorospheres σε 20 µL Stem-Trol Control Cells:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Κανονικοποιημένος απόλυτος αριθμός Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1.240 κύτταρα/µL.
3. Επαληθεύστε τον απόλυτο αριθμό των Stem-Trol Control Cells που ελήφθη, συγκρίνοντάς τον με τα Stem-Trol
Control Cells.
