■
Calibrate and verify instrument performance ..................... 84
Instrument and block calibration . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84
Calibration and verification schedule . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
Calibration descriptions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86
View the calibration status and set reminders . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
View the calibration status on the instrument . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
Set calibration frequency and reminders on the instrument . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88
View calibration status and set reminders on the Connect platform . . . . . . . . . . . . . . 88
Review calibration status . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89
Calibration workflow . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
Prepare a calibration plate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
Perform calibrations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91
View the calibration images . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
Transfer calibration results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 94
Transfer calibration data files . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 94
Troubleshoot calibration failure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
Identify contamination . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
Create a background plate
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
Perform ROI/uniformity, background, dye, and normalization calibrations for the
™
Calibration workflow . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
Prepare a calibration TaqMan
™
Array Card . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98
Perform calibrations . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100
View the calibration images . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
Troubleshoot normalization calibration failure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 102
Instrument verification description . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104
RNase P instrument verification plate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 104
Performance specifications pass criteria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
Prepare an RNase P plate . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 105
Perform RNase P verification . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 106
Troubleshoot verification failure . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
Perform verification using RNase P with a TaqMan
™
Array Card . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
RNase P instrument verification TaqMan
™
Array Card . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 109
™
Array Card . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 110
Overview of custom dyes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 113
Use a dilution series to determine an optimal custom dye concentration . . . . . . . . . 114
Calibrate the custom dye . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117
Contents
8
QuantStudio
™
6 Pro Real-Time PCR System and QuantStudio
™
7 Pro Real-Time PCR System User Guide