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(Français)
FR
Ne pas utiliser les Tests 3M Petrifilm SEC qui présentent des signes de décoloration. La date de péremption et le
numéro de lot figurent sur chacune des poches des Tests 3M Petrifilm SEC. Le numéro de lot est également indiqué sur
tous les Tests 3M Petrifilm SEC.
Mise au Rebut
Après usage, les Tests 3M Petrifilm SEC peuvent contenir des micro-organismes susceptibles de présenter un risque
biologique potentiel. Respecter les normes en vigueur concernant l’élimination des déchets.
Instructions D’utilisation
Suivre attentivement toutes les instructions. Dans le cas contraire, les résultats obtenus risquent d’être inexacts.
Préparation de l’échantillon
1. Utiliser des diluants stériles appropriés : Eau de dilution tamponnée au phosphate Butterfield
5
, eau peptonée
à 0,1 %
5
, diluant peptone-sel
6
, eau peptonée tamponnée
6
, solution de Ringer diluée au quart
6
, solution
d’hydrogénophosphate de potassium
6
, solution saline (0,85 – 0,90 %), bouillon de Letheen sans bisulfite ou eau
distillée.
Se référer à la section «
Instructions spécifiques pour méthodes validées
» pour connaître les exigences
spécifiques.
Ne pas utiliser de diluants contenant du citrate, du bisulfite ou du thiosulfate avec les Tests 3M Petrifilm SEC,
car ils peuvent inhiber la croissance.
Si une solution tampon au citrate est indiquée dans la procédure standard, la
remplacer par l’un des tampons cités plus haut, réchauffé à une température de 40 à 45 °C (104 à 113 °F).
2. Mélanger ou homogénéiser l’échantillon.
3. Pour obtenir des conditions de croissance et de recouvrement optimales des micro-organismes, ajuster le pH de
l’échantillon dilué entre 6,5 et 7,5. Pour les produits acides, ajuster le pH avec NaOH 1
N
. Pour les produits alcalins,
ajuster le pH avec HCl 1
N
.
Test
1. Placer le Test 3M Petrifilm SEC sur une surface de travail plane et régulière.
2. Soulever le film supérieur et, en tenant la pipette perpendiculairement à la zone d’inoculation, déposer 1 ml
d’échantillon dilué au centre du film inférieur.
3. Recouvrir délicatement l’échantillon avec le film supérieur pour éviter de piéger des bulles d’air.
4. Placer le 3M™ Petrifilm™ Diffuseur, face plane au contact du test, au centre du Test 3M Petrifilm SEC. Répartir
l’échantillon uniformément en exerçant une légère pression au centre du 3M Petrifilm Diffuseur. Répartir l’inoculum
sur la totalité de la zone de croissance du Test 3M Petrifilm SEC avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser le
3M Petrifilm Diffuseur sur le film.
5. Retirer le 3M Petrifilm Diffuseur et laisser reposer le Test 3M Petrifilm SEC durant au moins une minute afin de
laisser le gel se former.
Incubation
Laisser incuber les Tests 3M Petrifilm SEC à l’horizontale, avec le film transparent vers le haut, en veillant à ne pas
empiler plus de 20 tests. Laisser incuber les Tests 3M Petrifilm SEC pendant 24 heures ± 2 heures à 42 °C ± 1 °C.
Plusieurs durées et températures d’incubation peuvent être utilisées en fonction des méthodes de référence locales en
vigueur. Certaines d’entre elles figurent dans la section «
Instructions spécifiques pour méthodes validées
».
Interprétation
1. Le dénombrement à l’aide des Tests 3M Petrifilm SEC peut se faire à l’aide d’un compteur de colonies standard
ou d’une autre source de lumière intense. Ne pas compter les colonies présentes sur le pourtour en mousse, la
sélectivité du milieu y est modifiée. Ne pas tenir compte des bulles artefacts qui étaient éventuellement présentes
avant l’incubation.
E. coli
produit des colonies de couleur vert foncé à vert clair. Les colonies peuvent être associées
à des bulles de gaz. Compter toutes les colonies allant du vert au bleu-vert comme étant des
E. coli
, qu’il y ait des
bulles de gaz ou non.
W
AVERTISSEMENT
Ne pas utiliser le Test 3M Petrifilm SEC pour la détection des
E. coli
O157. Étant donné que la plupart des
souches d
’E. coli
O157 sont atypiques, elles sont par exemple glucuronidase négatives, elles ne produiront pas
de couleur bleu-vert et ne seront pas détectées comme étant des
E-coli
par les Tests 3M Petrifilm SEC.
