3M Petrifilm, Product Instructions

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(Português) PT
Descarte
Após serem utilizadas, as Placas 3M Petrifilm SEC podem conter microorganismos que podem representar um possível
risco biológico. Siga as normas industriais vigentes para descarte.
Instruções de Uso
Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos.
Preparo da amostra
1. Use diluentes estéreis adequados: água de diluição tamponada de fosfato de Butterfield
5
, água peptonada a 0,1%
5
,
diluente de sal peptonado
6
, água peptonada tamponada
6
, solução de Ringer com um quarto de força
6
, solução de
hidrogenofosfato dipotássico
6
, solução salina (0,85 – 0,90%), caldo Letheen sem bissulfito, ou água destilada.
Consulte a seção “
Instruções Específicas para Métodos Validados
” para obter requisitos específicos.
Não utilize diluentes que contenham citrato, bissulfito ou tiossulfato com as Placas 3M Petrifilm SEC; eles
podem inibir o crescimento.
Se o tampão de citrato for indicado no procedimento padrão, substitua-o por um dos
tampões listados acima, aquecidos a 40 - 45°C (104 - 113°F).
2. Misture ou homogeneíze a amostra.
3. Para crescimento e recuperação ideal dos micro-organismos, ajuste o pH da suspensão da amostra para ficar entre
6,5 e 7,5. Para produtos ácidos, ajuste o pH com 1 N NaOH. Para produtos alcalinos, ajuste o pH com 1 N HCl.
Plaqueamento
1. Coloque a Placa 3M Petrifilm SEC sobre uma superfície nivelada e plana.
2. Levante a película superior e, com a pipeta perpendicular à área de inoculação, despeje 1 mL da suspensão da
amostra no centro da película inferior.
3. Role o filme superior para baixo para a amostra, para evitar o aprisionamento de bolhas de ar.
4. Coloque o Difusor 3M™ Petrifilm™ com o lado plano para baixo no centro da Placa 3M Petrifilm SEC. Pressione
delicadamente o centro do Difusor 3M Petrifilm para distribuir a amostra uniformemente. Espalhe o inóculo sobre
toda a área de crescimento da Placa 3M Petrifilm SEC antes que o gel se forme. Não arraste o Difusor 3M Petrifilm
sobre o filme.
5. Remova o Difusor 3M Petrifilm e deixe a Placa 3M Petrifilm SEC imóvel por pelo menos um minuto para permitir a
formação do gel.
Incubação
Incube as Placas 3M Petrifilm SEC em posição horizontal, com a superfície limpa voltada para cima, em pilhas de até 20
placas. Incube as Placas 3M Petrifilm SEC durante 24 horas (± 2 horas) a 42°C (± 1°C). Diversos tempos e temperaturas
de incubação podem ser utilizados, dependendo dos métodos de referência locais atuais, alguns dos quais estão
listados na seção intitulada “
Instruções Específicas para Métodos Validados
”, abaixo.
Interpretação
1. As Placas 3M Petrifilm SEC podem ser contadas usando um contador de colônias padrão ou qualquer outro
amplificador iluminado. Não conte as colônias presentes na espuma, pois elas não estão sob a ação dos agentes de
seletividade do meio. Não conte bolhas artificiais que possam estar presentes. A E. coli produz colônias de verde-
escuro a verde-claro. As colônias podem ter bolhas de gás associadas a elas. Conte todas as colônias de verde a
azul-esverdeado como E. coli , quer exista ou não a presença de bolhas de gás.
W
AVISO
Não utilize a Placa 3M Petrifilm SEC para detecção de
E. coli
O157. Devido ao fato de a maior parte das cepas de
E. coli O157 serem atípicas - por exemplo, elas são negativas para glucuronidase e não produzem uma cor azul-
esverdeada - elas não serão interpretadas como E. coli nas Placas 3M Petrifilm SEC.
2. A área de crescimento circular tem aproximadamente 20 cm
2
. Em Placas 3M Petrifilm SEC que contenham mais
de 150 colônias, as contagens podem ser estimadas contando-se o número de colônias em dois ou mais quadrados
representativos e determinando o número médio por quadrado. Multiplique o número médio por 20 para determinar
a contagem estimada por Placa 3M Petrifilm SEC.
3. Quando existe presença de colônias em grandes proporções, as Placas 3M Petrifilm SEC farão com que toda a
área de crescimento fique cinza ou azul, e apresentarão uma ou ambas as seguintes características: muitas colônias
pequenas, indistintas e/ou muitas bolhas de gás. Quando isto ocorre, registre os resultados como incontáveis (INC).
Quando uma contagem real for necessária, plaqueie em uma diluição maior.