3M Petrifilm, Product Instructions

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(Italiano) IT
Non utilizzare le Piastre 3M Petrifilm SEC in presenza di segni di scolorimento. Data di scadenza e numero di lotto sono
riportati su ogni confezione di Piastre 3M Petrifilm SEC. Il numero di lotto è anche riportato sulle singole Piastre 3M
Petrifilm SEC.
Smaltimento
Dopo l’uso, le Piastre 3M Petrifilm SEC possono contenere microrganismi che possono rappresentare un potenziale
rischio biologico. Seguire le normative vigenti del settore per lo smaltimento.
Istruzioni per L’uso
Seguire attentamente tutte le istruzioni. In caso contrario, si possono ottenere risultati non precisi.
Preparazione del campione
1. Usare i diluenti sterili appropriati: Acqua di diluizione con tampone fosfato di Butterfield
5
, 0,1% acqua peptonata
5
,
diluente peptone salino
6
, acqua peptonata tamponata
6
, soluzione di Ringer con un quarto di intensità
6
,
idrogenofosfato dipotassico
6
, soluzione salina (0,85-0,90%), brodo letheen senza bisolfiti o acqua distillata.
Per i requisiti specifici, consultare la sezione “ Istruzioni specifiche per metodi validati ”.
Non utilizzare diluenti contenenti citrato, bisolfito o tiosolfato con le Piastre 3M Petrifilm SEC: possono
inibire la crescita. Se nella procedura standard viene indicato il tampone citrato, sostituire con uno dei tamponi
elencati sopra, riscaldato a 40-45 °C (104-113 °F).
2. Miscelare o omogeneizzare il campione.
3. Per una crescita ottimale e una ripresa della vitalità dei microrganismi, regolare il pH della sospensione del campione
tra 6,5 e 7,5. Per i prodotti acidi, regolare il pH con 1 N NaOH. Per i prodotti alcalini, regolare il pH con 1 N HCl.
Semina
1. Posizionare la Piastra 3M Petrifilm SEC su una superficie piana e livellata.
2. Sollevare la pellicola superiore e con la pipetta perpendicolare all’area di inoculazione erogare 1 ml di sospensione
del campione sul centro della pellicola inferiore.
3. Srotolare la pellicola superiore sul campione per evitare di intrappolare eventuali bolle d’aria.
4. Collocare il Diffusore per Piastre 3M™ Petrifilm™ con il lato piatto rivolto verso il basso al centro della Piastra 3M
Petrifilm SEC. Distribuire uniformemente il campione esercitando una leggera pressione al centro del Diffusore per
Piastre 3M Petrifilm. Distribuire l’inoculo sull’intera area di crescita della Piastra 3M Petrifilm SEC prima che si formi
il gel. Non far scorrere il Diffusore per Piastre 3M Petrifilm sulla pellicola.
5. Rimuovere il Diffusore per Piastre 3M Petrifilm e lasciare riposare la Piastra 3M Petrifilm SEC per almeno un minuto
in modo da consentire la formazione del gel.
Incubazione
Incubare le Piastre 3M Petrifilm SEC in posizione orizzontale, con la faccia trasparente rivolta verso l’alto in pile di non
più di 20 piastre. Incubare le Piastre 3M Petrifilm SEC per 24 ore ± 2 ore a 42 °C ± 1 °C. È possibile utilizzare tempi e
temperature di incubazione diversi a seconda dei metodi di riferimento locali, alcuni dei quali sono riportati nella sezione
seguente “ Istruzioni specifiche per metodi validati ”.
Interpretazione
1. Le Piastre 3M Petrifilm SEC possono essere sottoposte a conteggio mediante un conta colonie standard o un’altra
sorgente di luce ingrandita. Le colonie sulla barriera schiumosa non vanno prese in considerazione a causa della
loro rimozione dall’influenza selettiva del terreno di coltura. Non contare le bolle artefatte che potrebbero essere
presenti. E. coli produce colonie da verde scuro a verde chiaro. Le colonie possono presentare bolle di gas associate.
Contare tutte le colonie da verde a blu-verde come E. coli , indipendentemente dal fatto che siano presenti o meno
bolle di gas.
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AVVERTENZA
Non utilizzare la Piastra 3M Petrifilm SEC per il rilevamento di E. coli O157. Poiché la maggior parte dei ceppi di
E. coli O157 sono atipici, essi sono glucuronidasi negativi, non produrranno una colorazione blu-verde e non
saranno interpretati come E. coli sulle Piastre 3M Petrifilm SEC.
2. L’area della superficie di crescita circolare è pari a circa 20 cm
2
. È possibile stimare i conteggi sulle Piastre
3M Petrifilm SEC contenenti più di 150 colonie, contando il numero di colonie presenti in due o più quadratini
rappresentativi e determinando il numero medio per quadratino. Moltiplicare il numero medio per 20 al fine di
determinare il conteggio totale per Piastra 3M Petrifilm SEC.