3
(Dansk)
DA
Prøveforberedelse
1. Anvend hensigtsmæssige, sterile fortyndingsvæsker: Butterfields fosfatbuffered fortyndingsvand
5
,
0,1 % peptonvand
5
, peptonsaltfortynder
6
, buffered peptonvand
6
, Ringer-opløsning med kvart styrke
6
,
dikaliumhydrogenfosfat
6
, saltvandsopløsning (0,85-0,90 %), bisulfit-fri letheenmedie eller destilleret vand.
Se afsnittet “
Specifik vejledning i validerede metoder
” for specifikke krav.
Brug ikke fortyndingsvæsker, som indeholder citrat, bisulfit eller thiosulfat med 3M Petrifilm SEC
Tælleplader; de kan hæmme væksten.
Hvis citratbuffer er angivet i den normale procedure, erstattes den med en
af bufferne angivet ovenfor, opvarmet til 40-45 °C.
2. Bland eller homogeniser prøven.
3. For optimal vækst og genvinding af mikroorganismer justeres prøvesuspensionens pH til 6,5-7,5. For sure produkter
justeres pH med 1
N
NaOH. For basiske produkter tilpasses pH med 1
N
HCl.
Udpladning
1. Anbring 3M Petrifilm SEC Tællepladen på en flad, plan overflade.
2. Løft den øverste film, og dispenser med pipetten vinkelret på podningsområdet 1 ml prøvesuspension midt på
underfilmen.
3. Rul den øverste film ned på prøven for at forhindre, at der kommer luftbobler.
4. Placer 3M™ Petrifilm™ Sprederen i midten af 3M Petrifilm SEC Tællepladen med den flade side nedad. Tryk
forsigtigt på midten af 3M Petrifilm Sprederen for at fordele prøven jævnt. Spred den afsatte prøve over hele 3M
Petrifilm SEC Tællepladens vækstområde, før gelen dannes. Lad ikke 3M Petrifilm Sprederen glide over filmen.
5. Fjern 3M Petrifilm Sprederen, og lad 3M Petrifilm SEC Tællepladen være uforstyrret i mindst 1 minut for at lade
gelen dannes.
Inkubation
Inkubér 3M Petrifilm SEC Tælleplader i en vandret stilling med den klare side opad i stakke på ikke mere end 20 plader.
Inkubér 3M Petrifilm SEC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 42 °C ± 1 °C. Flere inkubationstider og -temperaturer kan
anvendes, afhængigt af de aktuelle lokale referencemetoder, hvoraf nogle er anført i nedenstående afsnit med titlen
“
Specifikke vejledninger for validerede metoder
”.
Fortolkning
1. 3M Petrifilm SEC Tælleplader kan tælles ved hjælp af en standard kolonitæller eller en anden lup med lys. Tæl ikke
kolonier på skumbarrieren, da de kan være uden for mediets selektive indflydelse. Tæl ikke artefakt-bobler, som
måtte være til stede.
E. coli
producerer mørkegrønne til lysegrønne kolonier. Kolonier kan have gasbobler forbundet
med dem. Tæl alle mørkegrønne til blågrønne kolonier som
E. coli
, uanset om der er bobler til stede eller ej.
W
ADVARSEL
Brug ikke 3M Petrifilm SEC Tælleplade til detektion af
E. coli
O157. Fordi de fleste
E. coli
O157-stammer er
atypiske, er de for eksempel glukoronidase-negative og producerer ikke en blågrøn farve, og de vil ikke blive
fortolket som
E. coli
på 3M Petrifilm SEC Tælleplader.
2. Det runde vækstområde er cirka 20 cm
2
. Der kan foretages skøn på 3M Petrifilm SEC Tælleplader, som indeholder
mere end 150 kolonier, ved at tælle antallet af kolonier i to eller flere repræsentative kvadrater og bestemme det
gennemsnitlige antal pr. kvadrat. For at bestemme den skønsmæssige tælling pr. 3M Petrifilm SEC Tælleplade
ganges gennemsnitstallet med 20.
3. Når der er kolonier til stede i store antal, vil 3M Petrifilm SEC Tælleplader forårsage, at hele vækstområdet bliver gråt
eller blåt og enten den ene eller begge af følgende karakteristika: Mange små kolonier, som ikke kan afgrænses, og/
eller mange gasbobler. Når dette sker, skal resultaterne angives som overgroede (TNTC). Når en faktisk optælling
kræves, anvendes en højere fortynding på pladen.
4. Kolonier kan isoleres for yderligere identifikation, efter behov. Løft den øverste film ved hjælp af korrekt
testningsteknik, og vælg kolonien fra gelen. Test vha. standardprocedurer.
5. Hvis 3M Petrifilm SEC Tælleplader ikke kan tælles inden for 1 time efter fjernelse fra inkubatoren, kan de lagres til
senere optælling ved nedfrysning i en forseglet beholder ved temperaturer lavere end eller lig med minus 15 °C i op
til en uge.
Se “Aflæsningsguide til 3M™ Petrifilm™ Select
E. coli
Tællepladefortolkningsvejledning” for yderligere oplysninger.
Hvis du har spørgsmål om specifikke applikationer eller procedurer, bedes du besøge vores websted på
www.3M.com/foodsafety eller kontakte din lokale 3M-repræsentant eller -distributør.
