B60231–AE
50 of 128
For
at
opnå
fastlæggelse
af
automatisk
beregnede
absolutte
tællinger
på
COULTER
EPICS
XL/XL-MCL-flowcytometre,
skal den korrekte Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres analyserede
koncentration indtastes før indhentning af prøven.
Indtast ”CAL” som navnet på de enkelte Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres i region G, og indtast værdien,
for eksempel, 1000 i feltet CAL FACTOR (CAL-faktor) i dialogboksen STATISTICS (statistik) i menuen SET-UP
SCREEN PROTOCOL (opsætning af skærmprotokol).
Indtastning af CAL Factor (CAL-faktor) til for Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres:
1. På skærmbilledet Acquisition Run (kør hentning) vælges Setup Screen >> Protocol (opsætning af
skærmprotokol).
2. Vælg Statistics (statistik) >> CAL FACTOR (CAL-faktor).
3. Indtast tallet for CAL factor (CAL-faktoren) (analyseret koncentration) fra hætteglasset med Stem-Count eller
Flow-Count Fluorospheres.
4. Tryk på ENTER (enter).
5. Vælg OKAY.
6. På skærmen skal du trykke på Y for ja (yes).
Når der kræves mindst 1000 enkelte fluorosfære spektrallinjer, tilpasses den absolutte tælling for CD34
+
Stem-Trol
Control Cells automatisk og kan kopieres direkte fra de udskrevne resultater over region D-statistikker.
Tabel (herunder):
Eksempler på statistikker med prøverør TROL 45/34/7-AAD på System II-software ved hjælp af funktionen CAL
FACTOR (CAL-faktor), hvor:
•
1024 er den analyserede koncentration Stem-Count Fluorospheres.
•
5248 er det samlede antal fluorofærer, der akkumuleres i CAL-regionen i løbet af hele hentningstiden.
I dette eksempel er alle tællinger justeret med: 1024/5248.
Statistik: Ikke
normaliseret hist
Listgating:
Region-id
deaktiveret
Justerede tællinger
(celler/µL)
1
A
LEUKS
9798
2
B
CD34 POS
279
3
C
CD45 DIM
264
4
D
Stem-Trol Control
Cells
248
7
G
CAL 1024
1024
5
H
Alle Stem-Count
Fluorospheres
1046
1. Registrer de tilpassede absolutte tællinger (celler/µL) i regionerne D fra TROL 45/34/7-AAD-prøverør.
.
Eksempel:
.
Prøverør TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 celler/µL.
2. Gang denne nøjagtige tælling med normaliseringsfaktoren (N) = 5.
.
BEMÆRK:
.
Det er nødvendigt at normalisere den absolutte tælling af Stem-Trol Control Cells, hvad angår volumener tilføjet under
testen: Bestem N ved at dividere volumenet af tællereferencen (de enkelte Stem-Count Fluorospheres) med volumenet af
Stem-Trol Control Cells tilføjet prøverøret.
.
..
Eksempel:
.
20 µL Stem-Trol Control Cells blev tilsat 100 µL Stem-Count Fluorospheres:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Normaliseret absolut tælling af Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1240 celler/µL.
