B60231–AE
57 of 128
Ange ”CAL” (kalibrering) som namn på region G för singletter av Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres och
ange sedan värdet. Ange till exempel 1 000 i rutan CAL FACTOR (Kalibreringsfaktor) i dialogrutan STATISTICS
(Statistik) på menyn SET-UP SCREEN PROTOCOL (Konfigurera screen-protokoll).
Ange CAL-faktor (kalibreringsfaktor) för Stem-Count eller Flow-Count Fluorospheres:
1. På skärmen Acquisition Run (Insamlingskörning) väljer du Setup Screen (Konfigurera screen) >> Protocol
(Protokoll).
2. Välj Statistics (Statistik) >> CAL FACTOR (Kalibreringsfaktor).
3. Ange värdet för CAL-faktor (kalibreringsfaktor) (analyserad koncentration) från flaskan med Stem-Count eller
Flow-Count Fluorospheres.
4. Tryck på ENTER.
5. Välj OKAY (Ok).
6. Skriv Y för yes (ja) vid frågan.
När minst 1 000 fluorosfärsingletter har samlats in justeras det absoluta antalet för CD34
+
Stem-Trol Control Cells
automatiskt och kan hämtas direkt från utskriftsresultaten för region D-statistiken.
Tabell (nedan):
Exempel på statistik som erhållits med provröret TROL 45/34/7-AAD på System II-programvara med funktionen
CAL FACTOR (kalibreringsfaktor), där:
•
1 024 är Stem-Count Fluorospheres analyserade koncentration.
•
5 248 är det totala antalet fluorosfärer ackumulerade i CAL-regionen (kalibreringsregionen) under hela
insamlingstiden.
I det här exemplet är alla antal justerade med: 1 024/5 248.
Statistik: Ej
normaliserat
histogram
Listgating:
region-ID
avaktiverat
Antal justerade
(celler/µL)
1
A
LEUKS
9 798
2
B
CD34 POS
279
3
C
CD45 DIM
264
4
D
Stem-Trol Control
Cells
248
7
G
CAL 1024
1 024
5
H
Alla Stem-Count
Fluorospheres
1 046
1. Registrera de justerade absoluta antalen (celler/µL) i regionerna D från provrören TROL 45/34/7-AAD.
.
Exempel:
.
Provrör TROL 45/34/7-AAD: Stem-Trol Control Cells = 248 celler/µL.
2. Multiplicera detta exakta antal med normaliseringsfaktorn (N) = 5.
.
OBS!
.
Det absoluta antalet Stem-Trol Control Cells måste normaliseras med hänsyn till volymerna som tillsatts under testet:
Bestäm N genom att dividera volymen för beräkningsreferens (singletter av Stem-Count Fluorospheres) med volymen
Stem-Trol Control Cells som tillsatts till provröret.
.
..
Exempel:
.
100 µL Stem-Count Fluorospheres tillsätts till 20 µL Stem-Trol Control Cells:
.
N = 100 ÷ 20 = 5
.
Absolut antal för normaliserade Stem-Trol Control Cells = 248 x 5 = 1 240 celler/µL.
3. Kontrollera erhållet Stem-Trol Control Cells absoluta antal genom att jämföra det med Stem-Trol Control Cells.
