NucleoBond
®
Xtra Midi/Maxi -
French
MACHEREY-NAGEL – 01/2008/ Rev. 04
49
Midi
Maxi
6
Equilibration
(Buffer EQU)
Equilibrez la colonne NucleoBond
®
Xtra
avec
le filtre
intégré avec le tampon d’équilibration
Equilibration
Buffer EQU.
Déposez le tampon sur la collerette du filtre comme le
montre le schéma. Laissez la colonne se vider par gravité
et assurez-vous que le filtre est entièrement mouillé.
La colonne ne s’assèche pas.
12 ml
25 ml
7
Neutralisation
(Buffer NEU)
Ajoutez le tampon de neutralisation
Neutralization Buffer NEU
à la suspension
et mélangez immédiatement avec précaution le lysat en
inversant
le tube
10-15
fois
.
Ne pas utiliser de vortex.
Le flacon ou le tube utilisé pour cette étape ne doit pas être rempli au plus des
deux tiers afin de permettre un mélange homogène. Veillez à neutraliser
complètement pour précipiter toutes les protéines et l’ADN chromosomique. Le
lysat doit passer d’une forme gluante et visqueuse à une forme moins visqueuse,
une suspension homogène et un floculat blanc.
Procédez immédiatement à l’étape 8.
Une incubation du lysat n’est pas
nécessaire.
Remarque : Augmentez proportionnellement le volume du tampon NEU si vous avez
utilisé une masse cellulaire supérieure à celle recommandée (voir section 4.6 pour des
informations sur la lyse optimale des cellules).
8 ml
12 ml
