NucleoBond
®
Xtra Midi/Maxi -
German
MACHEREY-NAGEL – 01/2008/ Rev. 04
36
Midi
Maxi
6
Äquilibrierung
(Buffer EQU)
Äquilibrieren Sie eine NucleoBond
®
Xtra Säule zusammen
mit dem eingesetzten NucleoBond
®
Xtra Filter mit
Equi-
libration
Buffer EQU
.
Geben Sie den Puffer auf den äußeren Rand des Filters
wie in der Abbildung rechts gezeigt. Lassen Sie die Flüs-
sigkeit vollständig durch die Säule laufen und stellen Sie
sicher, daß der NucleoBond
®
Xtra Filter komplett benetzt
ist.
Die Säulen laufen nicht trocken.
12 ml
25 ml
7
Neutralisation
(Buffer NEU)
Geben Sie
Neutralization Buffer NEU
zu der Suspension und mischen Sie sofort
aber vorsichtig durch
10- bis 15-maliges Invertieren
.
Vortexen Sie nicht.
Das für diesen Schritt verwendete Gefäß sollte nicht mehr als zwei Drittel gefüllt
sein, um ein gleichmäßiges Durchmischen zu ermöglichen. Stellen Sie sicher,
dass die Neutralisation vollständig ist, um eine quantitative Fällung von Protein
und genomischer DNA zu gewährleisten. Das schleimige, viskose Lysat sollte
nach Zugabe von
Buffer NEU
dünnflüssig werden und eine homogene Suspensi-
on mit flockigem, weißem Präzipitat ausbilden.
Fahren Sie sofort mit Schritt 8 fort.
Eine Inkubation des Lysates ist nicht not-
wendig
.
Hinweis: Hinweis: Erhöhen Sie das Volumen des Puffers NEU proportional falls mehr als
die empfohlene Zellmasse eingesetzt wird (für Informationen zur optimalen Zelllyse siehe
Kapitel 4.6).
8 ml
12 ml
