27
изображението на дъгата на разряд върху знака "+" на повърхността на хартиения лист (в центъра на полето на окуляра).
Поставете обектива с увеличение 4x и след това с увеличение 10x на пътя на лъчите. Като наблюдавате в окуляра и движите
колектора с бутона (фиг. 1, 7), постигнете най-равномерно осветяване на полето.
Наблюдение на обекти
За изследване във флуоресцентна светлина обектите са подложени на обработка със специални багрила (флуорохроми),
които имат специфични спектрални характеристики на абсорбция (възбуждане) и светлина. В съответствие с
флуорохрома, използван за обработка на предметното стъкло, е необходимо да се постави един от петте блока за
разделяне на лъча по пътя на лъчите на флуоресцентния осветител, посочен в таблица 1 на подраздел "Осветителна
система с падаща светлина".
Например при доста често срещано третиране на предметни стъкла с помощта на FITC се изисква спектрален модул № 3
("B"), за аурамин — модул № 4 ("V"), за оцветители, светещи в червения спектър — модул № 2 ("G"). За оцветители DAPI и
Hoechst се използва модул № 6 ("U"); при работа с този модул филтърът трябва да се отстрани от пътя на лъчите с бутона
(фиг. 2, 1).
След това направете следното:
•
монтирайте обекта върху предметната маса (фиг. 2, 10) на микроскопа;
•
активирайте обектива с увеличение 10x по пътя на лъчите (препоръчително е да започнете процеса на регулиране на
фокуса от обективи с ниско или средно увеличение с достатъчно големи полета и работни разстояния);
•
фокусирайте микроскопа, като въртите бутоните (фиг. 2, 12 и 13), за да получите отчетливо изображение на обекта;
•
затворете полевата диафрагма и апертурната диафрагма с бутоните (фиг. 1, 5 и 6);
•
като наблюдавате изображението на обекта, уверете се, че изображението на ирисовата полева диафрагма е
разположено концентрично спрямо полето на окуляра (ако диафрагмата е изместена, центровайте я);
•
ако изображението на полевата диафрагма е изместено, поставете изображението в центъра на полето с бутоните
(фиг. 2, 2);
•
отворете полевата диафрагма с бутона (фиг. 1, 5) по протежение на диаметъра на полето на окуляра, така че
ръбовете на ирисовата диафрагма да са малко извън полето на окуляра;
•
отворете апертурната диафрагма с бутона (фиг. 1, 6), като наблюдавате полето на окуляра, уверете се, че
осветяването е достатъчно равномерно, ако е необходимо, регулирайте фокуса на колектора с бутона (фиг. 1, 7);
•
когато работите с пропусната светлина, извършете регулиране на фокуса върху обекта за наблюдение с
бинокулярните тръби по същия начин, както е показано в подраздел "Регулиране на фокуса на микроскопа за
бинокулярно наблюдение";
•
започнете да изследвате обектите с кратки почивки в работата си. За да се предотврати избледняването на
предметното стъкло, е необходимо да заглушите светлинния поток от лампата с бутона (фиг. 2, 1).
Увеличение на микроскопа и диаметър на полето върху обекта
Общото увеличение на микроскопа Г в процеса на визуално наблюдение с бинокулярна глава се определя по следната
формула:
Γ
=
β
ob ∙
β
h ∙
Γ
eye
където βob — линейно увеличение на обектива на микроскопа;
βh — линейно увеличение на главата, равно на 1,0;
Гeye — видимо увеличение на окуляра.
Диаметърът на полето, наблюдавано върху обекта, Dob mm, се определя по следната формулa:
D
ob =
D
eye
β
ob ∙
β
h
където Deye — диаметър на полето на окуляра, ограничено от полевата диафрагма на окуляра, в mm.
