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Manuseamento da lente da objetiva de imersão
Manuseie a lente da objetiva de imersão nas instalações com uma temperatura de + 15 a + 25 °С. Utilize óleo de imersão com um
índice de refração nD = 1,515.
AVISO! NÃO UTILIZE SUBSTITUTOS EM VEZ DO ÓLEO DE IMERSÃO, UMA VEZ QUE PODE AGRAVAR SIGNIFICATIVAMENTE
A QUALIDADE DA IMAGEM.
Antes de manusear a lente da objetiva de imersão, configure o microscópio conforme especificado nas subsecções "Ativação
da lâmpada de halogéneo e configuração da iluminação" e "Seleção de lentes da objetiva" e identifique claramente o site do
objeto para uma investigação mais detalhada.
Para manusear a lente da objetiva de imersão:
•
baixe a platina com um botão (Fig. 2, 13);
•
aplique óleo de imersão no objeto;
•
levante cuidadosamente a platina, utilizando botões de focagem grosseira (Fig. 2, 13) até que a lente da objetiva entre
em contacto com a gota de imersão no objeto;
•
observando através das oculares e utilizando o botão de focagem fina (Fig. 1, 19 ou Fig. 2, 12), obtenha uma imagem
nítida do objeto examinado.
Se imagens de bolhas de ar que possam estar na camada de óleo de imersão aparecerem no campo da ocular no processo de
focagem, utilize os botões de focagem grosseira (Fig. 2, 13), baixe a platina e repita a focagem.
Para investigar os objetos, é necessário certificar-se de que o diafragma da íris da lente da objetiva 100х/1,3 está aberto.
Para aumentar o contraste da imagem, ajuste primeiro o diafragma de abertura do condensador com um botão (Fig. 3, 1) e, em
seguida, efetue um ajuste mais preciso do contraste com o diafragma de íris da lente da objetiva.
Após a conclusão da operação, remova o óleo de imersão da lente da objetiva frontal com papel absorvente e limpe as
superfícies contaminadas com algodão enrolado num palito e levemente embebido em éter ou mistura de álcool.
Não empurre a lente da objetiva frontal durante a limpeza.
Se o contraste da imagem tiver diminuído ou a nitidez desaparecer em consequência do manuseamento incorreto da lente da
objetiva de imersão, é recomendado o seguinte:
•
desaparafuse a lente da objetiva e limpe a lente frontal como mostrado acima;
•
utilizando luz oblíqua de um candeeiro de mesa e uma lupa, certifique-se de que não existem sujidades, vestígios de óleo
de imersão, rachaduras ou mossas na superfície da lente frontal;
•
verifique a configuração da iluminação do microscópio (o diafragma de abertura do condensador deve ser aberto por
tamanho da ocular da lente ou por 2/3 do tamanho da ocular).
Observação de objetos à luz de fluorescência
Configuração de iluminação e ativação de lâmpadas de mercúrio
Ligue a unidade de alimentação da lâmpada de mercúrio à rede. Ative a lâmpada de mercúrio, colocando o interruptor de
alimentação na posição "I".
Demora, pelo menos, 10 minutos para que a lâmpada de mercúrio atinja os parâmetros de funcionamento. O modo normal de
funcionamento da lâmpada significa que as setas do amperímetro e do voltímetro estão no meio da escala.
AVISO! NÃO DESATIVE A LÂMPADA DE MERCÚRIO ANTES DE 15 MINUTOS APÓS A IGNIÇÃO! PODE REATIVAR A LÂMPADA
APENAS 15—20 MINUTOS APÓS A SUA DESATIVAÇÃO!
Desenhe o sinal "+" numa folha de papel branco com o tamanho da platina e coloque a folha na platina. Coloque a lente da objetiva
de ampliação de 4x na trajetória dos raios. Deslize o botão (Fig. 2, 1) na caixa e coloque o filtro na trajetória dos raios. Utilizando
os botões (Fig. 1, 5 e 6), abra o campo e o diafragma de abertura. Instale o anel (Fig. 1, 27) para mudar as unidades de separação
de feixes espetrais na posição n.º3 ("B").
Observando através da ocular e movendo a platina com o botão de focagem grosseira (Fig. 2, 13), obtenha uma imagem da
superfície da folha de papel. Movendo a folha de papel na superfície da platina, coloque a imagem "+" no centro do campo da
ocular. Coloque a base livre do revólver da lente da objetiva na trajetória dos raios.
Observando do lado (não através da ocular) na superfície da folha de papel, mova o coletor com o botão (Fig. 1, 7) para obter a
imagem mais nítida do arco de descarga da lâmpada de mercúrio e respetivos elétrodos. Utilizando os botões 10 e 11 (Fig. 1), que
regulam a posição da lâmpada de mercúrio, coloque a imagem do arco de descarga no sinal "+" na superfície da folha de papel (no
centro do campo da ocular). Coloque a lente da objetiva de ampliação de 4x e de 10x na trajetória dos raios. Observando através
da ocular e movendo o coletor com o botão (Fig. 1, 7), obtenha a iluminação mais uniforme do campo.
Observação de objetos
Para investigação à luz de fluorescência, os objetos são expostos a tratamento com corantes especiais (fluorocromos) com
características espetrais específicas de absorção (excitação) e brilho. De acordo com o fluorocromo utilizado para tratar
a lâmina, será necessário instalar uma das cinco unidades de separação de feixes na trajetória dos raios do iluminador
fluorescente indicado na tabela 1 da subsecção "Sistema de iluminação de luz de incidência".
Por exemplo, para um tratamento bastante comum de lâminas com FITC, a unidade espetral n.º 3 ("B") é necessária para
auramina — unidade n.º 4 ("V"), para manchas que brilham na gama espetral vermelha, – unidade n.º 2 ("G"). Para as manchas
DAPI e Hoechst, é utilizada a unidade n.º 6 ("U"); ao trabalhar com esta unidade, o filtro tem de ser removido da trajetória
dos raios com um botão (Fig. 2, 1).
