RECOGIDA Y PREPARACION DE MUESTRAS
La muestra consistirá en suero recién obtenido. Las muestras se pueden guardar hasta 4 días a una
temperatura entre 15...30°C, hasta 2 semanas entre 2...6°C, o 6 meses a -20°C
6
.
Las muestras de orina deben aplicarse puras, sin mezclar. Las muestras de suero se diluirán de acuerdo
con la tabla siguiente, utilizando el diluente de muestras:
Concentración monoclonal
Línea SP
G, A, M,
κκ
,,
λλ
> 3 g/L
1+2
Pura
3 a 10 g/L
1+2
1+4
10 a 25 g/L
1+2
1+9
25 a 50 g/L
1+2
1+19
PROCEDIMIENTO PASO A PASO
1.
Con una pipeta, introducir 35µl de la muestra en la cavidad correspondiente de la bandeja de
muestras SAS-1 o en vasos de recogida de muestras desechables.
ii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1 yy SSA
ASS--1
1 P
Pllu
uss:: Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra en la gaveta del
aplicador. Asegurarse de que la bandeja está firmemente introducida en su posición. Procurar
asegurar la correcta alineación de la bandeja con la muestra dentro de la gaveta.
iiii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--3
3:: Colocar cuidadosamente la bandeja con la muestra utilizando los pasadores de
localización de la base de la muestra. Asegurar que la bandeja está en una posición segura.
2.
Sacar el gel del envase y:
ii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1:: colocarlo en el SAS-1, con la agarosa hacia arriba, alineando los lados positivo y
negativo con los bornes de los electrodos correspondientes.
iiii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1 P
Pllu
uss:: pipetear 400µL de REP Prep en el disipador térmico. Colocar el gel en el
disipador térmico, con el lado de agarosa hacia arriba, alineando los lados positivo y negativo con
los bornes de los electrodos correspondientes, teniendo cuidado de evitar las burbujas aéreas
debajo del gel.
iiiiii)) SSo
ollo
o p
paarraa 3
3:: colocar la guía de alineación en los pasadores y pipetear 400µL de REP Prep en el
centro de la cámara. Colocar el gel en la cámara con la agarosa hacia arriba, utilizar la guía para
alinear los lados positivo y negativo con los bordes, teniendo cuidado de evitar las burbujas aéreas
debajo del gel.
3.
Secar la superficie del gel con un secante C y luego desechar el secante.
4.
ii)) SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1:: Conectar los electrodos a la parte superior de los bornes, de forma que estén
en contacto con los bloques tampón.
iiii)) SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1 P
Pllu
uss:: (igual que el anterior). Colocar la cubierta del gel sobre el gel y los
electrodos, presionar con firmeza durante 5 segundos para asegurar un buen contacto.
iiiiii)) SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--3
3:: Conectar los electrodos a la parte superior de los bornes, de forma que estén
en contacto con los bloques tampón.
5.
Colocar dos juegos de aplicadores en posición en el instrumento. ((SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--3
3:: ranuras A y
10).
6.
Realizar la electroforesis de la inmunofijación:
ii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1:: 80 voltios, 20 minutos
iiii))
SSo
ollo
o p
paarraa SSA
ASS--1
1 P
Pllu
uss::
Electroforesis: 100 Volts, 18 minutos, 20°C
Incubation el paso 1: 8 minutos, 37°C (Incubation)
Incubation el paso 2: 8 minutos, 40°C (D Secar)
38
