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(Português)
PT
Instruções de Uso
Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos.
Preparo da Amostra
1. Colete amostras ambientais, utilizando um esfregão, uma esponja pré-umidificada ou outro dispositivo de coleta. O
agente umidificador pode ser um diluente estéril ou um tampão, como um caldo letheen ou um caldo neutralizante.
2. Assepticamente, adicione 5mL de água peptonada tamponada estéril (20-30°C)
4,5
(usada como caldo restaurador) à
amostra coletada.
3. Misture, homogeneíze ou centrifugue a amostra coletada (passo nº 1) com caldo restaurador por aproximadamente
um minuto.
4. Permita que a amostra coletada permaneça em temperatura ambiente, 20-30°C, de 1 hora até, no máximo, 1 hora
e meia.
5. Para crescimento ou recuperação bacteriana ideal, a amostra deve ter um pH entre 4 e 9.
Plaqueamento
1. Coloque a Placa 3M Petrifilm EL sobre uma superfície nivelada e plana.
2. Antes do plaqueamento, misture ou centrifugue a amostra coletada novamente.
3. Retire 3 mL de líquido da amostra coletada. Para alguns dispositivos de amostragem como esponjas, aperte o
dispositivo para liberar o líquido para o plaqueamento.
4. Levante o filme superior e, com a pipeta perpendicular, aplique 3 mL da suspensão da amostra no centro do filme inferior.
5. Role o filme superior para baixo para a amostra, para evitar o aprisionamento de bolhas de ar.
6. Com cuidado, coloque o Difusor 3M™ Petrifilm™ Quadrado Grande no centro da Placa 3M Petrifilm EL para
distribuir a amostra igualmente por toda a área de crescimento da Placa 3M Petrifilm EL.
7. Remova o difusor e deixe a Placa 3M Petrifilm EL em repouso por pelo menos dez minutos para permitir a formação
do gel.
Incubação
Incube as Placas 3M Petrifilm EL em posição horizontal, com a superfície limpa voltada para cima, em pilhas de até
10 placas. Incube as Placas 3M Petrifilm EL por 28 horas ± 2 horas a 35°C ± 1°C ou 37°C ± 1°C. Diversos tempos e
temperaturas de incubação podem ser utilizados, dependendo dos atuais métodos de consulta locais, alguns dos quais
estão listados na seção “
Instruções Específicas para Métodos Validados”
.
Incubações que durem mais tempo que o
recomendado podem gerar resultados ambíguos.
Interpretação
1. As Placas 3M Petrifilm EL podem ser contadas ou interpretadas com o uso de um contador de colônias padrão ou
outro amplificador iluminado.
2. A área de crescimento circular tem aproximadamente 42 cm
2
.
3. A Placa 3M Petrifilm EL pode ser usada como um teste quantitativo, semiquantitativo ou qualitativo.
a. Para um teste quantitativo, conte e registre todas as colônias vermelho-violetas. Não conte as colônias
presentes na espuma, pois elas não estão sob a ação dos agentes de seletividade do meio.
b. Para um teste semiquantitativo, registre os resultados como alto, médio ou baixo com base no número relativo
de colônias vermelho-violetas presentes. A designação de alto, médio ou baixo depende da localização da
amostra e dos padrões individuais da planta.
c. Para um teste qualitativo, registre os resultados da amostra plaqueada como positivo (detectado) ou negativo
(não detectado) com base na presença ou na ausência de colônias vermelho-violetas.
4. Se as Placas 3M Petrifilm EL tiverem sido incubadas pelo período mínimo e possuírem colônias rosas e/ou cinzas,
incube novamente essas placas pelo período máximo de incubação para garantir o desenvolvimento ideal da
coloração. Conte e interprete como no passo 3.
5. Quando as colônias estiverem presentes em grande número, as Placas 3M Petrifilm EL podem possuir colônias
pequenas e indistintas e/ou de coloração completamente rosa-amarronzada.
a. Para um teste quantitativo, registre os resultados como numerosos demais para contar (TNTC).
b. Para um teste semiquantitativo, registre os resultados como altos.
c. Para um teste qualitativo, registre os resultados como positivo (detectado).
