![3M Petrifilm Скачать руководство пользователя страница 84](http://html1.mh-extra.com/html/3m/petrifilm/petrifilm_product-instructions_444021084.webp)
3
(Türkçe)
TR
Numune Hazırlama
1. Uygun steril seyrelticiler kullanın: Butterfields fosfat tamponlu seyreltilmiş su
5
, %0,1 peptonlu su
5
, pepton tuz
seyreltici
6
, tamponlu peptonlu su
6
, çeyrek kuvvette Ringer çözeltisi
6
, dipotasyum hidrojen fosfat
6
, salin çözeltisi
(%0,85-0,90), bisülfit içermeyen letheen besiyeri veya distile su.
Özel gereksinimler için “
Valide Edilmiş Yöntemler İçin Özel Talimatlar
” bölümüne bakın.
Üremeyi inhibe edebileceğinden, 3M Petrifilm SEC Plakaları ile sitrat, bisülfit veya tiyosülfat içeren
seyrelticiler kullanmayın.
Standart prosedürde sitratlı tampon belirtilmişse, bunun yerine, 40-45°C’ye (104-113°F)
kadar ısıtılmış olarak yukarıda sıralanan tamponlardan birini kullanın.
2. Numuneyi karıştırın veya homojen hale getirin.
3. Mikroorganizmaların uygun şekilde üremesi ve geri kazanımı için, numune süspansiyonunun pH’ını 6,5-7,5’e
ayarlayın. Asidik ürünler için, pH’ı 1
N
NaOH ile ayarlayın. Alkali ürünler için pH’ı 1
N
HCl ile ayarlayın.
Plaka İnokülasyonu
1. 3M Petrifilm SEC Plakasını düz, eğimsiz bir yüzeye yerleştirin.
2. Üst filmi kaldırın ve inokülasyon alanına dik konumda tutulan bir pipet kullanarak, alt filmin ortasına 1 mL numune
süspansiyonu uygulayın.
3. Hava kabarcığı kalmasını önlemek için üst tabakayı numunenin üstünden yuvarlayarak geçirin.
4. 3M™ Petrifilm™ Dağıtıcıyı, düz tarafı 3M Petrifilm SEC Plakasının ortasına bakacak biçimde yerleştirin. Numuneyi
eşit şekilde dağıtmak için 3M Petrifilm Dağıtıcının ortasına hafifçe bastırın. Jel oluşmadan önce inokülümü 3M
Petrifilm SEC Plakasının tüm üreme alanına yayın. 3M Petrifilm Dağıtıcıyı film üzerinde kaydırmayın.
5. 3M Petrifilm Dağıtıcıyı kaldırın ve 3M Petrifilm SEC Plakasını hiç kıpırdatmadan en az bir dakika kadar jelin
oluşmasını bekleyin.
İnkübasyon
3M Petrifilm SEC Plakalarını, yatay bir konumda, şeffaf kısmı yukarı bakacak şekilde ve üst üste 20 taneden fazla
koymadan inkübe edin. 3M Petrifilm SEC Plakalarını 42ºC ± 1°C’de 24 saat ± 2 saat inkübe edin. Bir kısmı aşağıdaki
“
Valide Edilmiş Yöntemler İçin Özel Talimatlar
” bölümünde sıralanmış olan, geçerli yerel referans yöntemlere bağlı
olarak, farklı inkübasyon süreleri ve sıcaklıkları kullanılabilir.
Yorumlama
1. 3M Petrifilm SEC Plakaları, standart bir koloni sayacı veya başka bir aydınlatmalı büyüteç kullanılarak sayılabilir.
Köpük seti üzerindeki koloniler ortamın seçici etkisinden çıktığı için bunları saymayın. Yapay oluşmuş kabarcık
varsa, bunları saymayın.
E. coli
koyu yeşil ile açık yeşil arası renkte koloniler üretir. Kolonilerde kendileri ile ilişkili gaz
kabarcıkları olabilir. Gaz kabarcıkları olsun ya da olmasın, tüm yeşil ila mavi-yeşil kolonileri
E. coli
olarak sayın.
W
UYARI
3M Petrifilm SEC Plakasını
E. coli
O157’nin tespiti için kullanmayın. Birçok
E. coli
O157 suşu atipik olduğu için,
örneğin glukronidaz negatif olduklarından, mavi-yeşil renk oluşturmazlar ve 3M Petrifilm SEC Plakalarında
E. coli
olarak yorumlanmazlar.
2. Dairesel üreme alanı yaklaşık 20 cm
2
’dir. Hesaplamalar, iki veya daha fazla temsili karedeki koloni sayısı sayılarak ve
her kare için ortalama sayı belirlenerek, 150 koloniden fazla koloni içeren 3M Petrifilm SEC Plakalarında yapılabilir.
Her 3M Petrifilm SEC Plakası için hesaplanan sayıyı belirlemek üzere ortalama sayıyı 20 ile çarpın.
3. Fazla sayıda koloni mevcut olduğunda, 3M Petrifilm SEC Plakalarında şu özelliklerden biri ya da her ikisi olacak
şekilde üreme alanı tamamen gri veya mavi renge dönebilir: çok sayıda küçük, belirsiz koloni ve/veya çok sayıda
gaz kabarcığı. Bu durum oluştuğunda, sonucu sayılamayacak kadar çok (TNTC = Too Numerous To Count) olarak
kaydedin. Gerçek bir sayım gerektiğinde, daha seyreltik bir plaka hazırlayın.
4. Gerektiğinde, daha net tanımlama için koloniler izole edilebilir. Uygun test tekniği kullanarak üst filmi kaldırın ve
koloniyi jelden alın. Standart prosedürleri kullanarak test edin.
5. 3M Petrifilm SEC Plakaları inkübatörden çıkarılmalarını takiben 1 saat içinde sayılamazsa, daha sonraki sayım için, bir
haftadan daha uzun bir süre olmamak üzere -15°C (5°F)’den düşük veya buna eşit sıcaklıklarda ağzı hava sızdırmaz
bir kutuda dondurularak saklanabilir.
Daha fazla bilgi için, “3M™ Petrifilm™ Hızlı
E. coli
Sayım Plakası Yorumlama Kılavuzu”na bakın. Belirli uygulamalar veya
prosedürler hakkında sorularınız varsa, lütfen www.3M.com/foodsafety adresindeki web sitemizi ziyaret edin veya yerel
3M temsilcisi ya da distribütörü ile irtibat kurun.