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20424816 Rev 06/21
20424816 Rev 06/21
Chinese
Chinese
中文 (
Chinese)
预期用途
Auto2D
®
电泳设备使2D电泳过程完全自动化，基于等电点
和分子量来分离蛋白质。它只需一个多小时即可完成蛋白
质的完全分离。
目录
•
Auto2D
®
电泳设备
•
电源线：
•
适用于日本和北美的电源线
•
适用于日本和北美的3P-2P转换插头
•
适用于欧洲的电源线
•
适用于中国的电源线
•
适用于英国的电源线
还需要（未包含）：
有关产品货号，请参见第52页的“产品订购”部分。
•
Auto2D
®
电极芯片Plus型
•
Auto2D
®
PAGE芯片
•
Auto2D
®
IEF芯片
•
Auto2D
®
溶液芯片Plus型
•
Auto2D
®
三-甘氨酸（Tris-Glycine）或三-三羟甲基甘
氨酸（Tris-Tricine）试剂盒
•
两性电解质（根据IEF芯片的pH范围选择合适的两
性电解质）
•
蒸馏水
•
滤纸，0.3 mm厚
网上用户指南
「ユーザーズガイド」の完全版包括的な詳細説明とレシ
ピ。可以从
SigmaAldrich.com
的Auto2D
®
设备产品页
面下载。
储存方法和稳定性
Auto2D
®
设备应仅在室内使用/存放。有关存放要求，
请参见每个部件的产品标签。
Y
Y
注意事项
仅供研究使用。
在使用本产品之前，请仔细阅读《安全表》
（随附）以及
上的完整版《用户指南》。
Auto2D
®
Plus工作流程
整个过程：66–138分钟（取决于配方）
制备样品
涂抹试剂
样品上样至凝胶
第一维度：等电聚焦
SDS平衡
第二维度：SDS-PAGE
检测
3分钟
10分钟
17分钟
3分钟
凝胶复水
33分钟
制备
试剂
1. 按照试剂盒随附的文件或完整版《用户指南》
（网上）中的说明制备和存放试剂盒。
2. 让以下低温储存的产品平衡至室温（20–25°C约
10分钟）。
•
IEF芯片
•
PAGE芯片
•
复水溶液
•
DTT溶液
•
两性电解质
3. 制备用于IEF芯片复水以及蛋白质样品提取/稀释
的工作复水溶液：
试剂
体积
最终
浓度
复水溶液
189 µL
DTT溶液 (1M)
10 µL
50 mM
两性电解质
*
1–2 µL
0.5–1% v/v
总计
200 µL
*
根据要使用的IEF芯片的范围选择两性电解质。
对于原液浓度为40％的两性电解质，添加1 µL。
对于100X的两性电解质，添加2 µL。
4. 在SDS-PAGE之前，制备工作平衡缓冲液以平衡
聚焦蛋白质。
试剂
体积
最终
浓度
平衡缓冲液预
混液
760 µL
DTT溶液 (1M)
40 µL
50 mM
总计
800 µL
样品制备
将蛋白质样品溶解于按照步骤3制备的工作复水溶液中。
可以用工作复水溶液将样品稀释2倍或更多倍，以达到想
要的蛋白质浓度，并降低盐浓度。
盐浓度过高会影响等电聚焦过程中的蛋白质分离，并造
成电流超过100 µA。高盐浓度的样品应通过以下方法
之一脱盐：
TCA /丙酮沉淀，然后将蛋白质在工作复水溶液中
重悬
或者
使用旋转柱进行缓冲液交换
或者
使用Auto2D
®
设备执行脱盐流程（有关更多信息，
请参见完整版的网上《用户指南》。）
说明：
在蛋白质重悬过程中，避免将蛋白质加热到37°C
以上。
量化蛋白质。可以加载0.1–100 µg的蛋白质进行2D电
泳。最佳蛋白质量取决于检测方法和样品复杂性。应将
以下蛋白质量作为起点，用户可能需要优化其特定样品
的上样量。
•
考马斯亮蓝染色：50 µg
•
荧光染色：10 µg
•
银染：5 µg
•
荧光预标记：3 µg
使用加载到溶液芯片中的蛋白质数量来确定是使用S
（小）、M（中）还是L（大）配方类型来进行蛋白质分离，
应用于设备的样品量为13–15 µL。必要时，可用工作复
水溶液稀释样品。
接通Auto2D
®
设备的电源
选择与您所在国家/地区的电源插座兼容的适当电源线
（设备随附）。将匹配的一端牢固地插入Auto2D
®
设备的
背面，将另一端牢固地插入电源插座。
电源开关位于Auto2D
®
设备背面的交流插口旁边。
向上按开关打开电源。
应用程序将自动启动。在屏幕上，选择Auto2D
®
Plus型。
