MODE D’EMPLOI
French (Français)
USAGE PREVU
CD-Chex CD34
®
est une préparation stabilisée de sang humain qui s’utilise comme contrôle complet
du processus d’évaluation des cellules CD34+. Ce dispositif est prévu pour l’utilisation avec
la trousse BD Biosciences ProCOUNT™ Progenitor Cell Enumeration Kit, la trousse BD™ Stem
Cell Enumeration Kit, la trousse Beckman Coulter
®
Stem-Kit™ et avec les systèmes utilisant le
protocole ISHAGE pour la numération des cellules CD34.
SOMMAIRE ET PRINCIPES
La numération des CD34 par cytométrie en flux permet une évaluation rapide et précise de la
fréquence des cellules souches CD34 positives dans les échantillons de moelle osseuse, sang
de cordon ombilical ou sang périphérique de patients traités par des facteurs de croissance
hématopoïétiques. L’aptitude à quantifier les cellules CD34 est utile lors de greffes de cellules
hématopoïétiques.
Les cellules souches CD34+ se distinguent sur la base de leurs propriétés de diffusion de la lumière
en conjonction avec les antigènes de surface. CD-Chex CD34 est conçu pour représenter un
échantillon sanguin contenant des cellules CD34 positives ayant des caractéristiques similaires
aux cellules progénitrices : propriétés de dispersion latérale faible/modérée et faible expression
de l’antigène CD45 (comparativement aux lymphocytes). Lorsqu’il est coloré avec des anticorps
monoclonaux pour la numération de cellules CD34+, le contrôle CD-Chex CD34 fournit des valeurs
de référence pour les cellules CD34+ dans les intervalles de la feuille de dosage.
REACTIFS
CD-Chex CD34 contient des leucocytes et des érythrocytes d’origine humaine dans un milieu de
conservation.
PRECAUTIONS
1. Pour usage diagnostique in vitro.
2. ATTENTION : Tous les produits sanguins doivent être traités comme potentiellement infectieux.
Le matériel d’origine à partir duquel ce produit est dérivé s’est avéré négatif après soumission
aux tests actuellement exigés par la FDA. Aucune méthode de test connue ne peut garantir
que les produits dérivés du sang humain ne transmettront pas d’agents infectieux. Consultez
l’onglet Instructions (IFU) dans le menu Ressources sur la page produit affichée sur le site
www.streck.com pour connaître les tests sanguins spécifiques exigés par la FDA.
3. Ce produit ne doit pas être mis au rebut avec les déchets ordinaires, mais avec les déchets
médicaux infectieux. Un rejet par incinération est recommandé.
4. Ce produit s’utilise tel que fourni. Sa modification par dilution ou addition d’autres produits dans
le flacon invalidera l’utilité diagnostique du produit.
5. Les produits CD-Chex CD34 ne doivent pas être utilisés comme étalons.
6. Les fiches techniques peuvent être obtenues sur le site www.streck.com, en appelant le
+1 402 691 7510 ou en appelant votre fournisseur local.
CONSERVATION ET STABILITE
CD-Chex CD34 est stable jusqu’à la date de péremption lorsqu’il est conservé entre
2 °C et 10 °C. Après ouverture, CD-Chex CD34 reste stable jusqu’à la « date limite après ouverture du
flacon », indiquée sur la feuille de dosage, à condition d’être conservé entre 2 °C et 10 °C.
NE PAS CONGELER.
INDICATIONS DE DETERIORATION DU PRODUIT
Si les valeurs CD-Chex CD34 ne se trouvent pas dans l’intervalle escompté, indiqué sur la feuille de
dosage, ou que les granulocytes indiquent une perte de diffusion vers l’avant (FSC) :
1. Lire la notice d’utilisation du produit de contrôle et le mode d’emploi de l’instrument.
2. Vérifier la date de péremption du produit sur le flacon. Jeter les produits périmés.
3. Doser un flacon non ouvert de CD-Chex CD34. Si les valeurs se situent toujours hors de
L’intervalle Escompté, appeler le Service technique de Streck au +1 402-691-7510 ou le contacter
en ligne sur le site [email protected].
4. L’agglutination de la suspension cellulaire indique une instabilité ou une détérioration, auquel cas
le produit ne devra pas être utilisé.
MODE D’EMPLOI
CD-Chex CD34 est conçu pour être utilisé avec les protocoles de numération ISHAGE CD34.
1,2,3
1. Suivre les instructions du fabricant pour l’alignement de l’instrument et l’analyse des échantillons.
2. Retirer un flacon de contrôle du réfrigérateur et le laisser se réchauffer à la température ambiante (entre
18 °C et 30 °C) pendant 15 minutes avant usage.
3. Procédure de mélange
(le mélange mécanique à l’aide d’un vortex ou d’un rotateur n’est pas
recommandé) :
Pour visionner une démonstration, consulter www.streck.com/mixing
.
a. Tenir le flacon à la verticale entre les paumes des mains et le rouler entre les mains pendant
20 à 30 secondes.
b. Tenir le flacon par ses extrémités entre le pouce et l’index et mélanger en retournant
doucement et complètement le flacon au moins 8 à 10 fois jusqu’à ce que toutes les cellules
soient correctement en suspension.
c. Aliquoter immédiatement après le mélange.
d. Les analyses suivantes pendant cette période de test peuvent être effectuées en retournant le
flacon 5 fois avant l’échantillonnage.
Remarque : Les flacons conservés pendant une période prolongée pourront exiger un mélange
supplémentaire.
4. Replacer le réactif de contrôle au réfrigérateur après échantillonnage pour assurer la stabilité
maximale du flacon ouvert.
5. Ajouter les anticorps monoclonaux recommandés dans chaque tube en suivant les instructions
du fabricant et mélanger délicatement.
6. Laisser incuber en suivant les instructions du fabricant des anticorps.
7. Ajouter la quantité recommandée d’agent hémolysant et suivre les instructions du fabricant.
8. Analyser par cytométrie en flux en suivant le protocole établi du laboratoire.
RESTRICTIONS
1. L’utilisation de CD-Chex CD34 n’est pas recommandée avec des anticorps qui ciblent les sites
antigéniques de classe I et de classe II de CD34.
2. CD-Chex CD34 a été conçu pour une utilisation avec un réactif de lyse des globules rouges et il
est possible que ses résultats ne se situent pas dans l’intervalle de l’essai s’il est analysé sans lyse
des globules rouges.
RESULTATS ESCOMPTES
Les valeurs de dosage moyennes fournies pour chaque paramètre sont dérivées d’analyses faites
en parallèle par cytométrie en flux sur des cytomètres correctement compensés
1,2,3,4
. Les valeurs
de dosage s’obtiennent à l’aide de réactifs pour la cytométrie en flux courants. Consulter le mode
d’emploi et la notice de dosage pour les limites ou les instructions spécifiques des réactifs.
Dès réception d’un nouveau lot de contrôles, il est recommandé que chaque laboratoire individuel
établisse ses propres moyennes et limites pour chaque paramètre. Toutefois, les moyennes de
contrôle définies par le laboratoire doivent se situer dans l’intervalle escompté, spécifié pour le
contrôle. Les intervalles escomptés répertoriés représentent des estimations d’écart compte tenu
des différents réactifs, protocoles de laboratoire, du calibrage et de la maintenance de l’instrument,
ainsi que de la technique utilisée par l’opérateur.
RÉFÉRENCES
1. Clinical and Laboratory Standards Institute, H42-A2, Enumeration of immunologically defined cell
populations by flow cytometry. Approved Guideline - Second Edition.
2. Keeney M, Chin-Yee I, Weir K, Popma J, Nayar R, Sutherland DR. Single platform flow cytometric
absolute CD34+ cell counts based on ISHAGE guidelines. Cytometry (Communications in Clinical
Cytometry) 1998; 34:61-70.
3. Sutherland DR, Anderson L, Keeney M, Nayar R, Chin-Yee IH. The ISHAGE guidelines for CD34+
cell determination by flow cytometry. Journal of Hematotherapy 1996; 5:213-226.
4. Marti G, Johnsen H, Sutherland R, Serke S. Letter to the editor: A convergence of methods for a
worldwide standard for CD34+ cell enumeration. Journal of Hematotherapy 1998; 7:105-109.
PROGRAMME DE CONTRÔLE DE LA QUALITÉ
Streck propose
STATS
®
, un programme de contrôle de qualité interlaboratoires qui est offert
gratuitement à tous les clients. Pour obtenir plus d’informations, contacter le service
STATS
au
+1 402-691-7495 ou envoyer un message à l’adresse courriel [email protected]. Pour tout
renseignement complémentaire, consulter le site www.streck.com.
INFORMATIONS CONCERNANT LES COMMANDES
Pour toute assistance, contacter le service clientèle au +1 402-333-1982. Pour plus d’informations,
consulter le site www.streck.com.
GLOSSAIRE DES SYMBOLES
Consulter l’onglet Instructions (IFU) dans le menu Ressources sur la page produit affichée sur le
site www.streck.com.
Les noms de marques et de produits des instruments appartiennent à leurs détenteurs respectifs.
Consulter le site www.streck.com/patents pour les brevets qui pourraient concerner ce produit.
