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Siemens Medical Solutions Diagnostics

Homocysteine

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Summary of Contents for Immulite Homocysteine 2000

Page 1: ...Siemens Medical Solutions Diagnostics Homocysteine ...

Page 2: ...early arteriosclerosis 1 Less severe genetic defects are also associated with moderate levels of Hcy 3 4 5 Homocysteine has been identified as a indicator of cardiovascular disease A meta analysis of 27 epidemiological studies has suggested that a 5 µmol L increase in tHcy could be associated with an odds ratio for coronary artery disease CAD of 1 6 for men and 1 8 for women the same increase in r...

Page 3: ...ibodies to HIV 1 and 2 for hepatitis B surface antigen and for antibodies to hepatitis C Sodium azide at concentrations less than 0 1 g dL has been added as a preservative On disposal flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing Chemiluminescent Substrate Avoid contamination and exposure to direct sunlight See insert Wat...

Page 4: ...volunteers age 22 66 were analyzed using the IMMULITE 2000 Homocysteine procedure The samples were drawn in heparinized plasma tubes and kept on ice prior to separation of the plasma from the cells The median value was 7 7 µmol L with a central 95 range of 5 0 12 µmol L Consider these limits as guidelines only Each laboratory should establish its own reference ranges Limitations Specimens from pat...

Page 5: ...n vacutainer tubes were collected from five volunteers for each tube type Some tubes were stored at room temperature while other tubes were kept on ice for various time periods prior to separation The graphs below show the effect of storage time and temperature for heparin EDTA and serum See graphs 1 3 Method Comparison 1 The assay was compared to a commercially available manual enzyme immunoassay...

Page 6: ...r LM Porter JM Homocysteine as a risk factor for atherosclerosis A Review Cardiovasc Pathol 1997 6 1 9 Technical Assistance In the United States contact Siemens Medical Solutions Diagnostics Technical Services department Tel 800 372 1782 or 973 927 2828 Fax 973 927 4101 Outside the United States contact your National Distributor The Quality System of Siemens Medical Solutions Diagnostics is certif...

Page 7: ...mocysteine 0 10 20 30 40 IML 2000 1 0 Kit A 0 024 µmol L r 0 966 Method Comparison 2 HPLC µmol L 0 10 20 30 40 50 IMMULITE 2000 Homocysteine 0 10 20 30 40 50 IML 2000 0 97 HPLC 0 71 µmol L r 0 974 Method Comparison 3 Kit B µmol L 5 10 15 20 25 IMMULITE 2000 Homocysteine 5 10 15 20 IML 2000 0 90 Kit B 0 02 µmol L r 0 925 Effect of Storage Temperature on Different Sample Types Graph 1 Heparin Graph ...

Page 8: ...icionada 3 Percentagem de reacção cruzada 4 ND não detectável Method Comparison Homocysteine Homocysteine Deutsch Homocystein Anwendung Zur in vitro Diagnostik unter Verwendung des IMMULITE 2000 Systems zur quantitativen Bestimmung von L Homocystein im Plasma oder Serum humanen Diese Bestimmungen können in der Diagnose und Therapie von Patienten mit Homocysteinurie oder Hypercysteinämie hilfreich ...

Page 9: ...chritte 2 30 minuten 2 Positionen in der Inkubationskette 1 Röhrchen zur Probenvorbehandlung 1 Röhrchen für die Immunreaktion Schritt 1 Freisetzung des gebundenen Homocysteins und Umwandlung zum SAH Schritt 2 Immunreaktion Probengewinnung Die Verwendung von Heparin bzw EDTA Plasma wird empfohlen Die Verwendung von Serumproben ist ebenfalls möglich Das Plasma Serum muss möglichst schnell von den Bl...

Page 10: ...T in Puffer und 11 5 ml alkalische Phosphatase konjugiert mit monoklonalen Anti SAH Antikörpern Maus in Puffer Bei 2 8 C bis zum Ablaufdatum haltbar L2KHO2 1 Behälter Vor Gebrauch den Aufkleber an der Perforation abreißen ohne dabei die Barcodierung zu beschädigen Die Folie von der Oberseite des Containers entfernen Den Schiebedeckel nach unten in die Führung des Reagenziendeckels einrasten lassen...

Page 11: ...lung mit S Adenosyl Methionin enthaltenden Therapeutika können falsch erhöhte Homocystein Spiegel gemessen werden Obwohl die Substanzen Carbamazepin Phenytoin 6 Azauridin und Anthopterin keine Kreuzreaktivität zeigen sollten Proben von Patienten die mit diesen Medikamenten behandelt werden sowie von Patienten die mit Methotrexat Stickstoffoxiden oder anderen Antikonvulsiva behandelt werden mit Vor...

Page 12: ...uf die Homocysteinkonzentration bei der Probenlagerung zu untersuchen wurde Heparin EDTA Plasma sowie Serum von 5 Probanden entnommen Vor der Zentrifugation wurden Röhrchen bei Raumtemperatur oder auf Eis gelagert Die graphische Darstellung zeigt die zeitabhängige Veränderung der Homocystein Konzentration durch die Lagerung bei unterschiedlichen Temperaturen Siehe Graph 1 3 Methodenvergleich 1 Der...

Page 13: ...clerosis 1 Defectos genéticos menos severos también están asociados con moderadamente elevados niveles de Hcy 3 4 5 La homocisteína ha sido identificada como marcador de enfermedad cardiovascular Un meta análisis 27 estudios epidemiológicos sugiere que un incremento de 5 µmol l en tHcy podría ser asociado con un incremento del ratio de probabilidad de enfermedad arterial o coronaria CAD de 1 6 par...

Page 14: ...auciones Para uso diagnóstico in vitro Reactivos Mantener a 2 8 C Desechar de acuerdo con las normas aplicables Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sífilis para anticuerpos frente al HIV 1 y 2 para el antígeno de superficie de he...

Page 15: ...MULITE 2000 Consulte el Manual del operador de IMMULITE 2000 para la preparación instalación ajuste ensayo y procedimientos de control de calidad Intervalo de ajuste recomendado 4 semanas Muestras de Control de Calidad Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de homocisteína bajo y alto Valores Esperados Los niveles de homocisteína pueden variar con la edad sexo ár...

Page 16: ...250 y 500 µmol l Ver la tabla de Recovery para resultados representativos Especificidad El ensayo es altamente específico para homocisteína Ver la tabla de Specificity Bilirrubina La presencia de bilirrubina conjugada y no conjugada en concentraciones hasta 200 mg l no tienen ningún efecto sobre los resultados en términos de precisión Hemólisis La presencia de hemoglobina en concentraciones hasta ...

Page 17: ...ne faussement augmentés Les résultats provenant de patients prenant l un des médicaments suivants méthotrexate carbamazépine phénytoïne oxide nitreux anti convulsivants ou 6 azauridine triacétate doivent être interprétés avec précaution car ces substances interfèrent avec le dosage de l homocystéine Introduction L homocystéine totale tHcy a émergé comme facteur de risque important dans l évaluatio...

Page 18: ...onservation sur glace rend particulièrement difficile l utilisation d échantillons sériques Il est recommandé de clarifier les échantillons hyperlipémiques par ultracentrifugation Des échantillons hémolysés peuvent être révélateurs d une préparation inadéquate du prélèvement avant son envoi au laboratoire il faudra donc interpréter les résultats avec prudence La centrifugation des échantillons sér...

Page 19: ...rture ou 6 mois aliquoté à 20 C L2KHO2 1 jeu Avant de procéder à un ajustement placer les étiquettes correspondant à l aliquot fournies avec le coffret sur des tubes en verre de sorte que les code barres soient lisibles par le lecteur Composants du coffret fournis séparément Diluant échantillon homocystéine L2HOZ Pour la dilution à bord des échantillons de concentration élevée 25 ml d un concentré...

Page 20: ...cystéine Les anticorps hétérophiles du sérum humain peuvent réagir avec les immunoglobulines faisant partie des composants du coffret et interférer avec les immunodosages in vitro Voir Boscato LM Stuart MC Heterophilic antibodies a problem for all immunoassays Clin Chem 1988 34 27 33 Les échantillons provenant de patients fréquemment exposés aux animaux ou aux produits sériques d origine animale p...

Page 21: ...age a été comparé à un immunodosage enzymatique manuel disponible dans le commerce coffret A sur 168 échantillons plasmatiques dont les concentrations allaient d environ 4 à 43 µmol l Voir le graphique Method Comparison 1 Par régression linéaire IML 2000 1 0 Coffret A 0 24 µmol l r 0 966 Moyennes 12 9 µmol l IMMULITE 2000 12 7 µmol l Coffret A Comparaison de méthode 2 Le test a également été compa...

Page 22: ...olesterolo 7 Inoltre pazienti con patologie renali croniche complicate da malattie arteriosclerotiche e cardiovascolari presentano valori elevati di tHcy dovuti all incapacità da parte dei reni di eliminare l Hcy dal sangue 1 2 3 Principio del Metodo Dosaggio immunologico competitivo L IMMULITE 2000 effettua un ciclo on line di pretrattamento del campione di plasma o di siero con S adenosil L omoc...

Page 23: ...me Substrato Chemiluminescente Evitare la contaminazione e l esposizione alla luce solare diretta Vedi metodica Acqua Utilizzare solo acqua distillata o deionizzata Materiali Forniti I componenti costituiscono un unico set Le etichette all interno della confezione sono necessarie per eseguire i dosaggi Contenitore di Sferette Omocisteina L2HO12 Con codice a barre 200 sferette coattate con S adenos...

Page 24: ...remenopausa 12 120 campioni di adulti volontari uomini e donne in apparente buono stato di salute età 22 66 sono stati testati utilizzando il dosaggio IMMULITE 2000 Omocisteina I campioni sono stati prelevati in provette eparinizzate e conservati nel ghiaccio prima della separazione del plasma dalle cellule Il valore mediano era 7 7 µmol L con un range centrale 95 di 5 0 12 µmol L Detti valori dov...

Page 25: ...A I campioni sono stati separati dalle cellule ed ai campioni mescolati è stata aggiunta omocisteina Gli stessi sono stati dosati con il dosaggio omocisteina IMMULITE 2000 con i seguenti risultati EDTA 0 98 Eparina 0 85 µmol L r 0 954 Siero 1 02 Eparina 0 53 µmol L r 0 975 Valore medio 20 2 µmol L Eparina 20 7 µmol L EDTA 20 1 µmol L Siero Per determinare gli effetti della conservazione sono stati...

Page 26: ...igada mas as formas livre oxidada e dissulfito também estão presentes Niveis muito elevados de Hcy são encontrados em doentes com homocistinuria uma alteração genética grave do do enzimas envolvidos no metabolismo da Hcy 1 2 3 Os doentes com homocistinuria exibem tromboembolismo arterial atraso mental e arterosclorose precoce 1 Defeitos genéticos menos severos estão também associados com niveis mo...

Page 27: ...ULITE 2000 Homocisteina não foram ainda testados com todas as possiveis variações originadas pelos tipos de tubos Consultar a secção Tipos de Amostras Alternativas para obter detalhes sobre os tubos que foram testados Volume de amostra 15 µL de plasma ou soro Estabilidade 14 dias a 2 8 C ou 6 meses a 20 C Precauções Para uso de diagnóstico in vitro Reagentes Manter a 2 8 C Elimine de acordo com as...

Page 28: ... de diluente da amostra 16 x 100 mm L2ZC 250 Tampas para tubos de diluente da amostra CCCM Um módulo de controlo de Marcador Cardíaco baseado em soro não humano de dois níveis contendo homocisteina como um dos quatro diferentes constituintes Também necessário Água destilada ou desionizada tubos de teste controlos Procedimento de doseamento Têr em atenção que para obter um desempenho óptimo é impor...

Page 29: ...0 µmol L O ensaio é monotorizado com padrão interno feito com materiais qualificados e procedimentos de medição Sensibilidade Analítica 0 5 µmol L Precisão As amostras foram ensaiadas em quadriplicado no durante vários dias num total de 20 séries e 80 réplicas Vêr a tabela Precision Linearidade As amostras foram doseadas sob vários níveis de diluição Ver a tabela de Linearity para dados representa...

Page 30: ...mol L Ver gráfico Method Comparison 2 Regressão linear IML 2000 0 97 HPLC 0 71 µmol L r 0 974 Médias 13 4 µmol L IMMULITE 2000 13 2 µmol L HPLC Metodo de Comparação 3 O ensaio foi comparado com outro imunoensaio disponivel comercialmente Kit B em 113 amostras de plasma Gama de concentração apróximadamente 4 a 23 µmol L Ver gráfico Method Comparison 3 Regressão linear IML 2000 0 90 Kit B 0 02 µmol ...

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