Agilent Technologies and C8, User Manual

Page: 86 / 90

Gradientes iniciais recomendados
Fase estacionária Observações de uso
A maioria das colunas de
fase reversa
Inicialmente 5% de metanol ou acetonitrila
e 100% de metanol ou acetonitrila como
solvente final.
ZORBAX Eclipse PAH* 30% ou 40% de acetonitrila inicialmente até
100% de acetonitrila como solvente final. Pode
ser necessário resfriar a coluna para 15 °C a
20 °C para obter uma melhor resolução.
ZORBAX Bonus-RP Para a eluição do composto é necessário
um modificador da fase móvel orgânica com
concentração mais baixa em comparação
com as fases estacionárias tradicionais de
cadeias longas do grupo alquila.
Colunas de molécula
grande (ex.: colunas
Poroshell 300, ZORBAX
300SB)
As separações de polipeptídios, proteínas,
fragmentos de DNA, etc., costumam usar
ácido trifluoroacético ou fórmico como
modificador para controlar o pH e/ou como
aditivo de pareamento iônico para obter
a retenção e a seletividade desejadas. Os
tampões orgânicos, como TRIS, são úteis
principalmente para aplicações de pH
intermediário.
* A melhor vida útil da coluna é alcançada a temperaturas inferiores a 40 °C.