18
IMMULITE 2000 Homocysteine (PIL2KHO-14, 2007-11-20)
risque qu'une augmentation de 0,5 mmol/l
du cholestérol.
7
De plus, les patients
atteints de pathologie rénale chronique
aggravée par une maladie
cardiovasculaire arthérosclérotique
présentent des taux d'Hcy élevés dus à
l'incapacité du rein à éliminer l'Hcy du
sang.
1,2,3
Principe du test
Immunodosage par compétition
L'IMMULITE 2000 réalise un cycle de
prétraitement à bord des échantillons
plasmatiques ou sériques par la solution de
S-adenosyl-L-homocystéine (SAH)
hydrolase et de dithiothreitol (DTT) dans un
godet réactionnel ne contenant pas de bille.
Après une incubation de 30 minutes,
l'échantillon prétraité est transféré dans un
second tube contenant une bille de
polystyrène revêtue de SAH et un anticorps
spécifique de SAH. Pendant une incubation
de 30 minutes, le SAH modifié provenant
de l'échantillon prétraité entre en
compétition avec le SAH fixé pour se lier à
l'anticorps anti-SAH marqué à la
phosphatase alcaline. Le conjugué non lié
est éliminé par lavage et séparation par
ultracentrifugation. Le substrat est ajouté et
la procédure continue comme décrite pour
les immunodosages classiques dans le
Manuel d'Utilisation.
Cycles d'incubation :
2 × 30 minutes. 2
positions d'incubation par dosage : 1
godet pour le prétraitement; 1 godet pour
la réaction immunologique.
Cycle 1:
Libération
de l'homocystéine
liée et transformation en SAH.
Cycle 2:
Réaction immunologique.
Recueil des échantillons
Les plasmas hépariné ou EDTA sontt
particulièrement recommandés, mais le
sérum est également utilisable. Il est
important de séparer le plasma ou sérum
des cellules dès que possible après
prélèvement, car la synthèse d'HCY peut
avoir lieu dans les hématies après le
prélèvement.
Les échantillons doivent
être conservés dans la glace entre le
prélèvement et la centrifugation.
Noter
que la conservation sur glace rend
particulièrement difficile l'utilisation
d'échantillons sériques.
Il est recommandé de clarifier les
échantillons hyperlipémiques par
ultracentrifugation.
Des échantillons hémolysés peuvent être
révélateurs d'une préparation inadéquate
du prélèvement avant son envoi au
laboratoire ; il faudra donc interpréter les
résultats avec prudence.
La centrifugation des échantillons
sériques avant la formation complète du
caillot peut entraîner la présence de
fibrine. Pour éviter les résultats erronés
dûs à la présence de fibrine, s'assurer de
la formation complète du caillot avant de
centrifuger les échantillons. Certains
échantillons, en particulier ceux provenant
de patients sous anti-coagulants, peuvent
nécessiter un temps plus long pour la
formation du caillot.
Des tubes pour prélèvements sanguins
provenant de fabricants différents peuvent
donner des résultats différents, selon les
matériaux et additifs utilisés, y compris
gels ou barrières physiques, activateurs
de la coagulation et/ou anticoagulants. Le
coffret Homocystéine IMMULITE 2000 n'a
pas été testé sur tous les types de tubes
possibles. Veuillez consulter le chapitre
intitulé Autres Types d'Échantillons pour
plus de renseignements sur les tubes qui
ont été évalués.
Volume nécessaire:
15 µl de plasma ou
de sérum.
Conditions de conservation:
14 jours à
+2°C/+8°C ou 6 mois à –20°C.
Précautions d'emploi
Réservé à un usage diagnostique
in vitro
.
Réactifs :
conserver les réactifs à +2/
+8 °C. Eliminer les déchets conformément
à la réglementation en vigueur.
Respecter les précautions d'emploi et
manipuler tous les composants du coffret
comme des produits potentiellement
infectieux. Les réactifs dérivés de produits
humains et utilisés dans ce coffret ont subi
un test sérologique pour la Syphilis et des
tests de dépistage pour les anticorps anti-
VIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigène de
surface de l'hépatite B, qui se sont tous
avérés négatifs.
De l'azide de sodium à des concentrations
inférieures à 0,1 g/dl a été ajouté comme
conservateur ; lors de l'élimination,
