BT-IFU-0086
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Meio preparado Oxoid
Oxoid Schaedler Anaerobe Agar with Sheep
Blood (Haemin and Vitamin K1)
PB5034A
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Utilização prevista
O Thermo Scientific™ Oxoid™ Schaedler Anaerobe Agar with
sheep Blood (haemin and vitamin K1) é um meio não seletivo para
o isolamento de bactérias anaeróbias obrigatórias e facultativas.
Exclusivamente para uso profissional (utilização em diagnóstico in
vitro).
Síntese e explicação
Schaedler, Dubos e Costello
1
formularam este meio para o
isolamento de microrganismos aeróbicos e anaeróbicos do trato
gastrointestinal de ratos. Mata, Carrillo e Villatoro
2
modificaram a
fórmula nos seus estudos sobre microflora fecal humana anaeróbica.
Esta fórmula modificada tem sido utilizada no Oxoid Schaedler
Anaerobe with sheep Blood (haemin and vitamin K1). O meio é
utilizado como um ágar não seletivo e altamente nutritivo para o
isolamento de anaeróbios.
Princípio
O caldo de triptona de soja e uma peptona especial fornecem
nitrogénio e outros nutrientes necessários para o crescimento. O
extrato de levedura fornece vitaminas e outros fatores de crescimento.
É adicionado ágar como um agente solidificador. A glicose é uma fonte
de hidratos de carbono e atua como um agente redutor. A hemina é
exigida por vários anaeróbios obrigatórios. O tampão Tris evita uma
queda extrema do pH durante a fermentação da glicose. A cisteína
atua como um agente redutor e estimula o crescimento de alguns
anaeróbios. A vitamina K é um requisito de crescimento para algumas
estirpes de
Prevotella melaninogenica
e potencia o crescimento de
alguns
Bacteroides fragilis
e de não formadores de esporos Gram-
positivos. O sangue de ovelha fornece hemina e substâncias
promotoras do crescimento adicionais.
Fórmula típica*
gramas por litro
Caldo de triptona de soja
10,0
Peptona especial
5,0
Extrato de levedura
5,0
Glicose
5,0
Cloreto de sódio
4,0
HCl de cisteína
0,4
Hemina
0,01
Tampão Tris
0,75
Ágar
13,5
Adições
por litro
Vitamina K1
0,002 g
Sangue de ovelha
desfibrinado
50,0 mL
* Ajustado conforme necessário de modo a cumprir as normas de
desempenho
Características físicas
Cor
Vermelho-sinal
Claridade
Opaco
Peso de enchimento
17 g ± 5%
pH
7,6 ± 0,2
Precauções
Este produto destina-se à utilização em diagnóstico
in vitro
e deve ser
utilizado apenas por pessoal qualificado. Isto inclui a eliminação de
reagentes usados ou não usados, assim como qualquer outro
material descartável contaminado, seguindo os procedimentos para
produtos
infeciosos
ou
potencialmente
infeciosos.
É
da
responsabilidade de cada laboratório gerir os resíduos produzidos de
acordo com a sua natureza e grau de perigo e de os mandar tratar ou
eliminar de acordo com qualquer regulamento local, nacional e
europeu. As instruções devem ser lidas e devidamente cumpridas.
Exclusivamente para uso profissional. A ficha de dados de segurança
está disponível mediante solicitação.
Armazenamento
Este produto está pronto a utilizar, não sendo necessária preparação
adicional.
Armazene o produto na sua embalagem original a 2–12 °C até à sua
utilização.
Armazene ao abrigo da luz.
Deixe o produto atingir a temperatura ambiente antes da utilização.
Não incube antes da utilização.
Colheita, manuseamento e armazenamento de
amostras
As amostras devem ser colhidas e manuseadas de acordo com as
diretrizes recomendadas.
Materiais necessários, mas não fornecidos
(1) Ansas de inoculação, swabs, recipientes de colheita
(2) Incubadoras
(3) Organismos para controlo de qualidade
É possível encontrar mais informações em www.thermofisher.com
Procedimento
Consulte quaisquer protocolos e diretrizes locais.
(1) Inocule e esgote a amostra no meio.
(2) Se estiver a ser cultivado material diretamente de um swab,
passe o swab sobre uma pequena superfície e esgote para
proceder ao isolamento de colónias únicas.
(3) Incube imediatamente as placas anaerobicamente a 36 °C ± 1 °C
durante 48 horas. As placas podem ser examinadas quanto ao
crescimento após 24 horas.
Pode ser exigida uma incubação prolongada para alguns anaeróbios.
Controlo de qualidade
Este meio pode ser testado com as seguintes estirpes:
Condições de incubação:
40–48 h a 36 ± 1 °C, anaeróbicas
Controlos positivos
Inóculo de 50–120 unidades formadoras de colónias (UFC).
Bacteroides fragilis
ATCC
TM
25285
2–4 mm, colónias brancas
brilhantes
Peptostreptococcus
anaerobius
ATCC
TM
27337
2–4 mm, colónias brancas
brilhantes
A contagem das colónias deve ser superior ou igual a 50%
do meio de controlo (Columbia agar with sheep blood).
Inóculo de 10
4
–10
5
UFC.
Clostridium perfringens
ATCC
TM
13124
Bom crescimento, colónias
creme com zona dupla de
hemólise
Nota:
É da responsabilidade do utilizador realizar testes de controlo de
qualidade tendo em conta a utilização prevista do meio e de acordo
com qualquer regulamentação local aplicável (frequência, número de
estirpes, temperatura de incubação etc.).
O produto não deve ser utilizado se: