BT-IFU-0086
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Milieu prêt à l’emploi Oxoid
Gélose Oxoid Schaedler pour anaérobies avec
sang de mouton (et Hémine +Vitamine K1)
PB5034A
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Utilisation prévue
La gélose Thermo Scientific™ Oxoid™ Schaedler pour anaérobies
avec sang de mouton (et Hémine +Vitamine K1)
est un milieu non
sélectif pour l’isolement de bactéries anaérobies obligatoires et
facultatives.
À usage professionnel uniquement (diagnostic in vitro).
Résumé et description
Schaedler, Dubos et Costello
1
ont formulé ce milieu pour l’isolement
de micro-organismes aérobies et anaérobies provenant du système
digestif de souris. Mata, Carrillo et Villatoro
2
ont modifié la formule
pour leurs études sur la microflore fécale humaine anaérobie. Cette
formule modifiée a été utilisée pour la gélose Oxoid Schaedler pour
anaérobies avec sang de mouton (et hémine+vitamine K1).
Le milieu
est utilisé comme une gélose non sélective, hautement nutritive pour
l’isolement des germes anaérobies.
Principe
Le bouillon tryptone soja et une peptone spéciale fournissent de
l’azote et d’autres nutriments nécessaires à la croissance. L’extrait
de levure fournit des vitamines et autres facteurs de croissance. La
gélose est ajoutée comme agent solidifiant. Le glucose est une
source d’hydrates de carbone et agit comme un agent réducteur.
L’hémine est nécessaire pour une large variété de germes
anaérobies obligatoires. Le tampon tris empêche une chute brutale
du pH pendant la fermentation du glucose. La cystéine agit comme
un agent réducteur et stimule la croissance de certains anaérobies.
La vitamine K est une exigence de croissance pour certaines
souches de
Prevotella melaninogenica
et accélère la croissance de
certains
Bacteroides fragilis
et de germes gram positif non sporulés.
Le sang de mouton fournit l’hémine et des substances
supplémentaires favorisant la croissance.
Formule classique*
grammes par litre
Bouillon tryptone soja
10,0
Peptone spéciale
5,0
Extrait de levure
5,0
Glucose
5,0
Chlorure de sodium
4,0
Chlorhydrate de cystéine
0,4
Hémine
0,01
Tampon Tris
0,75
Gélose
13,5
Ajouts
par litre
Vitamine K1
0,002 g
Sang de mouton défibriné
50,0 ml
* Ajustés selon le besoin pour répondre aux normes de performance
Caractéristiques physiques
Couleur
Rouge de sécurité
Clarté
Opaque
Poids de remplissage
17 g ± 5%
pH
7,6 ± 0,2
Précautions
Ce produit est destiné au diagnostic
in vitro
et ne devrait être utilisé
que par du personnel formé. Cela inclut l’élimination des réactifs
utilisés ou inutilisés ainsi que de tout autre matériel jetable contaminé
après les procédures impliquant des produits infectieux ou
potentiellement infectieux. Chaque laboratoire est responsable de la
gestion des déchets produits selon leur nature et leur degré de
dangerosité, ainsi que de leur traitement et mise au rebut
conformément aux réglementations fédérales, étatiques et locales en
vigueur. Ces instructions doivent être lues attentivement et
appliquées avec soin.
À usage professionnel uniquement. Fiches de données de sécurité
disponibles sur demande.
Stockage
Ce produit est prêt à l’emploi et aucune préparation supplémentaire
n’est nécessaire.
Conserver le produit dans son emballage d’origine entre 2 et 12°C
jusqu’à ce qu’il soit utilisé.
À conserver à l’abri de la lumière.
Laissez le produit s’équilibrer à température ambiante avant
utilisation. Ne pas incuber avant utilisation.
Prélèvement, manipulation et stockage des
échantillons
Les échantillons doivent être prélevés et manipulés conformément
aux directives recommandées.
Matériel requis mais non fourni
(1) Oeses, écouvillons, récipients de collecte
(2) Incubateurs
(3) Organismes pour le contrôle qualité
Davantage d’informations sur www.thermofisher.com
Procédure
Consulter les recommandations et protocoles locaux.
(1) Inoculer et ensemencer l’échantillon sur le milieu.
(2) Si de la matière est mise en culture directement à partir d’un
écouvillon, le rouler sur une petite surface et l’ensemencer pour
l’isolement de colonies individuelles.
(3) Incuber immédiatement les boîtes en anaérobiose à 36 ± 1°C
pendant 48 heures. La croissance des boîtes peut être examinée
après 24 heures.
Une incubation prolongée peut être requise pour certains anaérobies.
Contrôle qualité
Ce milieu peut être testé avec les souches suivantes :
Conditions d’incubation :
40 à 48 h à 36 ± 1°C, en anaérobiose
Contrôles positifs
Inoculum de 50 à 120 unités formant des colonies (UFC).
Bacteroides fragilis
ATCC
TM
25285
2 à 4 mm, colonies
blanches brillantes
Peptostreptococcus
anaerobius
ATCC
TM
27337
2 à 4 mm, colonies
blanches brillantes
Le nombre de colonies doit être supérieur ou égal à 50 % du
milieu de contrôle (gélose Columbia avec sang de mouton).
Inoculum de 10
4
à 10
5
UFC.
Clostridium perfringens
ATCC
TM
13124
Bonne croissance, colonies
de couleur blanc cassé
avec double zone
d’hémolyse
Remarque :
L’utilisateur est responsable de réaliser le test de contrôle qualité en
tenant compte de l’utilisation prévue du milieu, et conformément à
toute réglementation locale applicable (fréquence, nombre de
souches, température d’incubation, etc.).
Le produit ne doit pas être utilisé si :
(1) Le produit est contaminé
(2) La couleur a changé
(3) La date d’expiration est dépassée
