Optika B-1000 POL, Instruction Manual

Page: 55 / 80

Page 55
Introdução ao contraste de fase
Os preparados sem nenhuma cor que não absorvem luz são chamados de “objetos de fase” pois alteram ligei-
ramente a fase da luz que os atravessa, atrasando-a tipicamente em 1/4 do comprimento da onda em relação
à luz direta que passa não desviada em redor da amostra. Infelizmente aos nossos olhos, como os sensores
das telecâmeras, não são capazes de apreciar essas diferenças de fase. O olho humano é sensível somente
às cores do espectro visível (variações na frequência da luz) ou a diferentes níveis de intensidade luminosa
(variações na amplitude da onda luminosa).
Nos objetos de fase, a “ordem zero” da luz passa através ou em redor da amostra não sendo desviada. A luz
difratada pelo objeto não é reduzida em amplitude (como nas amostras opacas), mas é atrasada (atraso de
fase) em função do índice de refração e da espessura da amostra. Esta luz difratada, atrasada em cerca de 1/4
de comprimento de onda, chega ao plano da imagem fora de fase em relação à luz direta não desviada mas
essencialmente não reduzida em intensidade. O resultado é que a imagem a nível ocular falta em contraste e
os detalhes da amostra são quase invisíveis.
Zernike teve sucesso em desenvolver um método, agora conhecido como Microscopia de Contraste de Fase,
que permite obter imagens contrastadas de objetos de fase transparentes, como se fossem amostras opacas.
Uma ilustração esquemática da configuração de um microscópio de contraste de fase é mostrada na figura 1.
Anel de Fase
Luz
desviada
Objetiva
Lâmina porta-preparado
Condensador
Diafragma
de anel
Fonte luminosa
Figura 1