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Para ver un resultado más preciso y obtener un fondo más oscuro, es necesario trabajar con un 

condensador diseñado especialmente para campo oscuro, por ejemplo que transmita rayos obli

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cuos. Hay diferentes modelos, condensadores de campo oscuro en “seco” con aire entre la lente 
superior del condensador y la parte inferior del porta-objetos. O bien condensadores de “inmersión” 
que requieren una gota de aceite de inmersión sobre la parte superior del condensador y la parte 
inferior del porta-objetos. También hay condensadores que aceptan una gota de agua en lugar de 
aceite, para realizar la misma función. El condensador de campo oscuro de inmersión posee lentes 
con espejos internos para dejar pasar los rayos de gran oblicuidad y libres de aberración cromática, 
los cuales producen mejores resultados en conseguir un fondo más negro. Tal vez el condensador 
de campo oscuro más ampliamente utilizado es el paraboloide, que consiste en una pieza sólida de 
vidrio con mucha precisión en la forma de un paraboloide.

El condensador de campo oscuro en “seco” trabaja bien con objetivos con A.N. por debajo de 0,75, 

mientras que el paraboloide o de “inmersión” (figura 3) puede trabajar con objetivos de A.N. más 
alta (hasta 1,4). Los objetivos con A.N. por mayor de 1,2 requieren reducir su apertura de trabajo 
ya que su A.N. puede exceder de la A.N. del condensador y por lo tanto podría entrar luz directa 
a través del objetivo. Por éste motivo, algunos objetivos con A.N. alta diseñados para trabajar en 
campo oscuro y campo claro estan construidos con un diafragma iris en su interior que actúa como 
un tope de apertura. 

Esta reducción de la apertura numérica limita también el poder de resolución del objetivo y la in

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tensidad de la luz de la imagen. Los objetivos diseñados exclusivamente para trabajar en campo 

oscuro se producen con una apertura numérica máxima cercana al límite inferior de la apertura 
numérica del condensador para campo oscuro. Estos no poseen diafragmas iris internos, sin 
embargo, los diámetros de sus lentes están ajustados de manera que, al menos una lente interna 

tenga el diámetro adecuado para funcionar como limitador de la apertura.

El condensador cardioide es muy sensible a la alineación y se debe colocar cuidadosamente para 

aprovechar el cono de luz. Por esto, resulta el condensador de campo oscuro más difícil de utilizar. 
Además, el condensador produce una importante cantidad de reflejos, incluso con las partículas de 
polvo más pequeñas, y una distancia focal pequeña puede perjudicar la iluminación de los objetos 
que poseen un tamaño o espesor de unos pocos micrones. Cuando se trabaja con preparaciones 
para microscopía de campo oscuro con alto poder de aumentos, asegurarse que el cristal de las 
preparaciones esté exento de impurezas fluorescentes.

3.1 MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO CON OBJETIVOS DE GRAN AUMENTO

Summary of Contents for B-500DK

Page 1: ...OPTIKA MICROSCOPES ITALY www optikamicroscopes com info optikamicroscopes com Ver 3 0 0 B 500DK B 500DK R OPERATION MANUAL MANUAL DE INSTRUCCIONES...

Page 2: ...OF DARKFIELD ILLUMINATION page 6 3 1 Darkfield Microscopy at High Magnifications 4 0 B 500DK DARKFIELD MICROSCOPE CONFIGURATION page 10 4 1 Troubleshooting 5 0 TECHNICAL TIPS FOR OIL IMMERSION MICROSC...

Page 3: ...ch the light travels An objective s numerical aperture is directly proportional to the refractive index of the imaging me dium between the coverslip and the front lens and also to the sin of one half...

Page 4: ...traight through the glass oil interface without deviation due to refraction The numerical aperture is thus increased by the factor of n the refractive index of oil Microscope objectives designed for u...

Page 5: ...ure and resolution in an optical microscope Figure 2 Homogeneous immersion system In this case the refractive index and dispersion of the objective front lens immersion oil substage condenser front le...

Page 6: ...e in all azimuths to form an inverted hollow cone of light with an apex centered in the specimen plane If no specimen is present and the numerical aperture of the condenser is greater than that of the...

Page 7: ...rs and ceramics containing small inclusions porosity differences or refractive index gradients Care should be taken when preparing specimens for darkfield microscopy because features that lie above an...

Page 8: ...cal aperture of the condenser thus allowing direct light to enter the objecti ve For this reason many high numerical aperture objectives designed for use with darkfield as well as brightfield illumina...

Page 9: ...r mount If the slide is too thick it is often difficult to focus the condenser without resorting to a higher viscosity immersion oil On the other hand slides that are too thin have a tendency to break...

Page 10: ...ective refer to B 500 general manual for the description of the standard bright field technique Use the condenser rack knob to lower and remove the brightfield substage condenser Insert the reflected...

Page 11: ...le that can be used for centering the optical path Use the condenser centering screws to move the ring of light into the center of the viewfield It could be useful to vary the height of the condenser...

Page 12: ...denser remove the microscope slide and slowly rack the condenser down below the mechanical stage and place a drop of oil directly on the front lens Replace the slide then slowly raise the condenser un...

Page 13: ...r an eyedropper to place a small droplet of oil directly on the front lens of the immersion objective Next place another droplet of oil on the cover glass immediately above the area to be imaged Next...

Page 14: ...the centering telescope into the eye tube to observe the rear focal plane of the objective If a bright ring of light is seen around a central dark region the aperture of the objective is too great an...

Page 15: ...0 B 500DK DARKFIELD MICROSCOPE CONFIGURATION Adjust the objective s iris diaphragm until the ring of light falls out of the viewfield CENTERING TELESCOPE VIEW INSIDE THE TELESCOPE WITH A WELL CENTERED...

Page 16: ...focus the specimen which should now appear brightly and evenly illuminated upon a dark background Careful attention should always be given to microscope alignment irrespective of whether the illumi na...

Page 17: ...the top lens is completely immersed in oil and in contact with the bottom of the slide Problem The viewfield has a dark spot in the center reducing illumination intensity but objects in the periphery...

Page 18: ...ly due to dust hair fibers and or dirt contamination of an optical surface somewhere above the condenser Thoroughly clean the specimen slide with optical grade tissue or cotton Occasionally this probl...

Page 19: ...p condenser may be incorrectly focused Re focus the condenser Problem The viewfield has bright spots and there are problems with achieving sharp focus of the specimen Solution Small air bubbles may be...

Page 20: ...ing of sufficient size to allow scanning of the oiled specimen without spilling oil onto the bottom of the stage Many advanced research microscopes have a stage insert that is removable for use with o...

Page 21: ...he microscope slide When scanning over a large area on a microscope slide it is often necessary to reapply some oil to assure continuity of the imaging medium Keep The Lenses Clean and Oil Free Always...

Page 22: ...edium intensity The typical lifetime of the internal battery pack is about 500 charge discharge cycles Recharging the battery In order to guarantee an optimum battery life and efficiency always follow...

Page 23: ...ase note After 2 hours of use at full intensity stop using the battery power supply even if the LED illu minator is still on excessive discharge may damage the batteries Batteries are subject to self...

Page 24: ...four screws that fix the back plastic cover Remove the plastic cover and gently lay it on the back of the microscope don t pull it too hard since it has cables attached to it Inside at the bottom you...

Page 25: ...w one pay attention to the correct polarity of each battery Reconnect the two poles connector and replace the battery holder inside the microscope Close the back plastic cover with the four screws Ple...

Page 26: ...nd recycles the raw mate rials contained in the equipment Such recovery however needs your help When at the end of its operating life you shall decide to dispose of the apparatus do not try to open it...

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Page 28: ...A LA ILUMINACI N DE CAMPO OSCURO pag 32 3 1 Microscopio de campo oscuro con objetivos de gran aumento 4 0 CONFIGURACI N DEL B 500DK pag 36 4 1 Resoluci n de problemas 5 0 TRUCOS T CNICOS PARA LA MICRO...

Page 29: ...y el medio a trav s del cual viaja la luz La apertura num rica A N de un objetivo es directamente proporcional al ndice de refracci n de la imagen entre el cubre objetos y la lente frontal y el seno t...

Page 30: ...igura 1 b los rayos de luz ahora pasan directamente a trav s del cubre objeto y no hay refracci n La apertura num rica es incrementada en el factor de n el ndice de refracci n del aceite Los objetivos...

Page 31: ...ne la muestra Este sistema se ha denominado Sistema de Inmersi n Homog neo y es el ideal para conseguir la m xima apertura num rica y resoluci n de un microscopio ptico Figura 2 sistema homog neo de i...

Page 32: ...z central que normalmente pasa a trav s y alrededor de la muestra lo que permite los rayos oblicuos pasar por todos los angulos y direc tamente hacia la muestra La lente superior de un condensador Abb...

Page 33: ...cuidado en la preparaci n de muestras para microscop a de campo oscuro debido a las caracter sticas que se encuentran por encima y por debajo del plano de enfoque que tambi n pueden dispersar la luz y...

Page 34: ...de exceder de la A N del condensador y por lo tanto podr a entrar luz directa a trav s del objetivo Por ste motivo algunos objetivos con A N alta dise ados para trabajar en campo oscuro y campo claro...

Page 35: ...agen cuando los porta objetos son demasiado gruesos o demasiado delgados Muchos de los condensadores de campo oscuro indican el grosor recomendable del porta objetos e ideal para un buen resultado Es...

Page 36: ...la t cnica de campo claro est ndar Baje el condensador con el mando de la izquierda y extraiga el condensador de campo claro Insere el condensador de campo oscuro en su lugar y sujetar bien con los to...

Page 37: ...rnillos para centrar el condensador mueva el punto de luz hasta que quede centrarlo sobre el campo de visi n Puede ayudarle en ste proceso el subir o bajar el condesador para tener una imagen m s clar...

Page 38: ...ara poner una gota de aceite de inmersi n en el condensador quitar la preparaci n de la platina y suavemente bajar el condensador poner una gota de aceite de inmersi n directa mente sobre la lente del...

Page 39: ...o por encima del rea a explorar A continuaci n gire r pidamente el objetivo de 100x con el aceite en su posici n por encima de la muestra hasta la fusi n de las dos gotas de aceite uno en la muestra y...

Page 40: ...ntrado para observar el plano focal posterior del objetivo Si viera un anillo brillante de luz alrededor de una regi n central oscura la apertura del objetivo es demasiado grande y deber cerrar el dia...

Page 41: ...CI N DEL B 500DK Ajuste el diafragma iris del objetivo hasta que el anillo de luz desaparezca del campo de visi n OCULAR TELESC PICO DE CENTRADO IMAGEN INTERNA A TRAV S DEL OCULAR TELESC PICO Y EL CON...

Page 42: ...debe aparecer brillante y uniformemente iluminada sobre un fondo oscuro Recomendamos poner siempre una especial y cuidadosa atenci n en el proceso de alineaci n del microscopio independientemente de s...

Page 43: ...plicar aceite de inmersi n y situar el condensador de manera que la parte superior de la lente est completamente sumergida en el aceite y en contacto con la parte inferior de la preparaci n Problema A...

Page 44: ...blemente es debido a que hay polvo fibras y o algun objeto contaminante so bre la superf cie del condensador Limpiar a fondo el porta objetos y el condensador en ocasiones ste problema tambi n es caus...

Page 45: ...ada Re centrar el condensa dor Problema El campo de visi n tiene puntos brillantes y da problemas para conseguir un enfoque n tido de la muestra Soluci n Puede que hayan burbujas de aire entre la lent...

Page 46: ...para formar una gota de aceite entre los dos como se describe a continua ci n Para la aplicaci n de aceite a la lente superior del condensador utilice las siguientes consi deraciones Aseg rese de que...

Page 47: ...tos a menudo es necesario volver a aplicar un poco de aceite para asegurar la continuidad del medio de formaci n de im genes Despu s de su uso limpie siempre todas las lentes y partes pticas de aciete...

Page 48: ...a vida til t pica de la bater a interna es de unos 500 ciclos de carga descarga Utilizaci n de la bater as recargables Con el fin de garantizar una ptima duraci n de la bater a y su eficiencia siga es...

Page 49: ...uso a plena intensidad deje de utilizar la fuente de alimentaci n de la bater a incluso si la luz LED de aviso sigue encendica La descarga excesiva puede da ar las bater as Las bater as est n sujetas...

Page 50: ...la cubierta de pl stico de nuevo Quite la cubierta de pl stico y col quela suavemente en la parte posterior del microscopio no tire de l con demasiada fuerza ya que tiene los cables conectados a la m...

Page 51: ...laridad de cada pila Vuelva a conectar el conector de dos polos y reemplazar el soporte de la bater a en el inte rior del microscopio Cierre la cubierta de pl stico de nuevo con los cuatro tornillos T...

Page 52: ...aci n ser llevada a cabo por el fabricante Por lo tanto el usuario que desee eliminar la presente instrumentaci n tendr que ponerse en contacto con el fabricante y seguir el sistema que ste ha adoptad...

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Page 56: ...TIKA S R L Via Rigla 30 Ponteranica BG ITALY Tel 39 035 571392 6 linee Telefax 39 035 571435 MAD Iberica Aparatos Cientificos c Puig i Pidemunt n 28 1 2 Pol Ind Pl d en Boet 08302 MATARO Barcelona Esp...

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