Merck Millipore Auto2D Quick Start Manual Download Page 19

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20424817 Rev 06/21

Japanese

日本語 (

Japanese)

用途

Auto2D

電気泳動デバイスは2D電気泳動のプロセスを

完全に自動化し、タンパク質分離をまず等電点で、次い

で分子量で分離します。わずか2時間でタンパク質の分離

が完了します。

梱包内容

•

Auto2D

電気泳動装置

•

電源ケーブル：

•

日本、北米用電源ケーブル

•

日本、北米用3P→2P変換プラグ

•

欧州用電源ケーブル

•

中国用電源ケーブル

•

英国用電源ケーブル

他にご用意いただくもの

(同梱されていません)

カタログ番号は51ページの「製品注文」をご覧ください。

•

Auto2D

Electrode Chip

•

Auto2D

PAGE Chip

•

Auto2D

IEF Chip

•

Auto2D

Solution Chip

•

Auto2D

Tris-Glycineまたは

Tris-Tricine Reagent Kit

•

アンフォライト (IEF ChipのpH範囲に応じて適切

なアンフォライトを選んでください)

•

蒸留水

オンラインユーザーガイド

完全版のユーザーガイドには、詳細な手順とレシピが含

まれています。

SigmaAldrich.com

のAuto2D

装置製品

ページからダウンロードしてください。

保管および安定性

Auto2D

装置は屋内でのみ使用、保管してください。保管

に関する要件については、各コンポーネントの製品ラベ

ルをご覧ください。

注意事項

本製品は研究用です。

本製品使用前にはSafety Sheet（同梱）と

SigmaAldrich.com

のユーザーガイド完全

版をお読みください。

Auto2D

のワークフロー

全プロセス： 100～155分（レシピによる）

試料の調製と不純物の除去

試薬のアプライ

試料の導入とゲルの膨潤

1次元目：

等電点電気泳動

SDS平衡化

2次元目：

SDS-PAGE

検出

30分

5分

30分

5分

準備

試薬

1. 試薬キットの調製を、キット同梱の文書または完

全版のユーザーガイド（オンライン）に従って行い

ます。

2. 低温で保管されている下記の製品を室温になじま

せます（20～25°C、約10分間）。

•

IEF Chip

•

PAGE Chip

• R

ehydration Solution

•

DTT Solution

•

アンフォライト

3. IEF Chipの膨潤およびタンパク質試料の抽出/希

釈のためのワーキングRehydration solutionを

調製します。

試薬

体積

最終濃度

Rehydration

Solution

189 µL

DTT Solution

(1M)

10 µL

50 mM

アンフォライト両

性電解質*

1～2 µL

0.5～1% v/v

合計

200 µL

* アンフォライトはIEF ChipのpH範囲に合わせ

て選んでください。40％原液のアンフォライトは

1µLを加えてください。100倍濃度のアンフォライ

トは2µLを加えてください。

4. SDS-PAGE前のタンパク質の平衡化用にワーキン

グEquilibration Bufferを調製してください。

試薬

体積

最終濃度

Equilibration

Buffer Premix

760 µL

DTT Solution

(1M)

40 µL

50 mM

合計

800 µL

試料の調製

タンパク質試料を、ステップ3に従って調製したワーキン

グRehydration solutionに溶解させます。液体の試料は

ワーキングRehydration solutionで2倍以上に希釈して、

目的のタンパク質濃度にし、塩濃度を出来るだけ減少さ

せるようにしてください。
塩濃度が高いと等電点電気泳動中に電流が100µAを

超え、タンパク質分離に影響することがあります。高塩

濃度の試料は次の内何れかの方法で脱塩を実施してく

ださい。

TCA/アセトン沈殿処理からのワーキング

Rehydration solutionによる再懸濁
または

スピンカラムを用いたワーキング

Rehydration solutionへの交換

注：

タンパク質の再懸濁中、タンパク質を37 °C以上に加

熱しないでください。
試料中のタンパク質を定量してください。Auto2Dには0.1

～25µgのタンパク質を導入できます。タンパク質の適量

は検出方法と試料の複雑さによって異なります。次のタン

パク質量をまず試してから、個々の試料に応じた最適な

導入量を決定してください。

•

CBB染色液による検出： 25 µg

•

蛍光染色液による検出： 10 µg

•

銀染色： 5 µg

•

蛍光pre-labeling： 3 µg

デバイスにアプライ出来る試料の体積は10～12 µLです。

試料は必要に応じてワーキングRehydration solutionで

希釈してください。

Auto2D

装置の電源を入れる

各国の電源コンセントに適切な電源コード（同梱）を選
択します。コードの片端をAuto2D

装置のインレットにしっ

かりと差し込み、プラグをコンセントに差し込みます。
電源スイッチはAuto2D

装置背面のACプラグポートの隣

にあります。スイッチを上に押し上げて電源を入れます。
アプリケーションは自動的に起動します。画面から

Auto2D

モード（オリジナル）を選択します。

Summary of Contents for Millipore Auto2D

Page 1: ...aAldrich com English 2 Français French 7 Español Spanish 13 Nederlands Dutch 19 Deutsch German 25 Italiano Italian 30 日本語 Japanese 36 中文 Chinese 41 한국어 Korean 46 Product Ordering 51 Quick Start Guide Auto2D Mode original BM 100 ...

Page 2: ... and extraction dilution of protein sample Reagents Volume Final Concentration Rehydration Solution 189 µL DTT Solution 1M 10 µL 50 mM Ampholyte 1 2 µL 0 5 1 v v Total 200 µL Select ampholyte according to the range of IEF Chip used For ampholytes at 40 w v stock concentration add 1 µL For ampholytes at 100X add 2 µL 4 Prepare Working Equilibration Buffer for equilibration of focused proteins befor...

Page 3: ...ce the Solution Chip dark blue lines on top of the PAGE Chip with the cut off corners in the front Apply the Solutions 7 6 5 1 2 4 a b c 3 3 1 Cathode Buffer 4500 µL 2 Anode Buffer 4000 µL 3 Distilled Water 4000 µL 4 Working Equilibration Buffer a 700 µL b 700 µL optional c 700 µL optional 5 Working Rehydration Solution 100 µL 6 Sample Solution 10 12 µL 7 Molecular Weight Marker 0 5 0 7 µL Cannot ...

Page 4: ...u go to SigmaAldrich com offices Technical Assistance Visit the tech service page at SigmaAldrich com techservice Standard Warranty The applicable warranty for the products listed in this publication may be found at SigmaAldrich com terms Français French Utilisation prévue L appareil d électrophorèse Auto2D permet d automatiser intégralement la procédure d électrophorèse 2D en séparant d abord les...

Page 5: ...protéines pour l électrophorèse 2D La quantité optimale de protéines dépend de la méthode de détection et de la complexité de l échantillon Les quantités suivantes de protéines doivent être utilisées comme point de départ Il est possible que les utilisateurs doivent optimiser la quantité de protéines chargées pour leur échantillon particulier Coloration au bleu brillant de Coomassie 25 µg Marquage...

Page 6: ...lectrophorèse vérifier ce qui suit La Puce Électrodes n est pas humide sauf au niveau des compartiments d anode et de cathode La cache transparente côté cathode de la Puce PAGE est retirée Les solutions ont été ajoutées aux emplacements prévus Démarrage de l électrophorèse Sélectionner CLOSE Fermer OK START Démarrer OK L électrophorèse commencera alors Après l électrophorèse Retirer le gel Sélecti...

Page 7: ...maAldrich com techservice Garantie La garantie applicable aux produits figurant dans cette publication est disponible sur SigmaAldrich com terms Español Spanish Indicaciones de uso La unidad de electroforesis Auto2D automatiza por completo el proceso de electroforesis bidimensional separando las proteínas primero por el punto isoeléctrico y luego por el peso molecular La separación completa de la ...

Page 8: ...g de proteína La cantidad óptima de proteína dependerá del método de detección y de la complejidad de la muestra Como punto de partida deberán utilizarse las siguientes cantidades de proteínas los usuarios quizá tengan que optimizar la cantidad cargada en función de su muestra concreta Tinción con azul brillante Coomassie 25 µg Tinción fluorescente 10 µg Tinción con plata 5 µg Premarcaje fluoresce...

Page 9: ...tes de empezar la etapa de electroforesis verifique lo siguiente El chip de electrodo no está húmedo excepto en las cámaras del ánodo y del cátodo Está retirada la tapa transparente del lado del cátodo del chip de PAGE Se ha añadido la disolución donde es necesaria Inicio de la electroforesis Elija CLOSE OK START OK CERRAR OK INICIAR OK La electroforesis empezará Después de la electroforesis Retir...

Page 10: ...nico en SigmaAldrich com techservice Garantía estándar La garantía aplicable a los productos indicados en esta publicación puede encontrarse en www sigmaaldrich com terms Nederlands Dutch Bedoeld gebruik Het Auto2D Electrophoresis Device automatiseert het proces van 2D elektroforese volledig en scheidt de eiwitten eerst per isolektrisch punt en als tweede per moleculair gewicht Volledige eiwitsche...

Page 11: ...worden gebruikt de gebruiker kan de laadhoeveelheid optimaliseren voor hun eigen monster Coomassie Brilliant Blue staining 25 µg Fluorescent staining 10 µg Silver staining 5 µg Fluorescent pre labeling 3 µg Het geappliceerde monstervolume op het apparaat is 10 12 µL Het monster kan worden verdund met Working Rehydration Solution indien noodzakelijk Inschakelen van Auto2D Device Selecteer het gesch...

Page 12: ...lleerd water 3 Open de cassette met spatel 4 Markeer de oriëntatie van de gel door een kleine inkeping te maken in een van de hoeken Hiermee kunt u de alkalische en zure zijden lokaliseren en hoog laag moleculair gewicht in uw gel zie hieronder Hoog moleculair gewicht Laag moleculair gewicht Zuur Alkalisch Reinigen Reinig de Electrode Chip onmiddellijk met gedestilleerd water en laat na gebruik aa...

Page 13: ...ngsanleitung auf SigmaAldrich com sorgfältig durch bevor Sie dieses Produkt verwenden Auto2D Arbeitsablauf Gesamter Prozess 100 155 Minuten je nach Rezeptur Probenvorbereitung Entfernung von Verunreinigungen Zugabe von Reagenzien Probenaufgabe und Gelrehydrierung Erste Dimension Isoelektrische Fokussierung SDS Äquilibrierung Zweite Dimension SDS PAGE Detektion 30 Minuten 5 Minuten 30 Minuten 30 Mi...

Page 14: ... die folgenden Produkte die bei niedrigen Temperaturen aufbewahrt werden etwa 10 Minuten auf Raumtemperatur 20 25 C aufwärmen IEF Chip PAGE Chip Rehydrierlösung DTT Lösung Ampholyt 3 Bereiten Sie die Rehydrier Arbeitslösung zur Rehydrierung des IEF Chips und Extraktion Verdünnung der Proteinprobe vor Reagenzien Volu men Endkonzen tration Rehydrierlö sung 189 µL DTT Lösung 1 M 10 µL 50 mM Ampholyt ...

Page 15: ...em Fall von unseren Kunden zu beachten Das Gleiche gilt für Rechte Dritter Unsere Informationen und Beratung entbinden unsere Kunden nicht von der Verantwortung unsere Produkte auf die Eignung für die vorgesehenen Zwecke zu prüfen Die Informationen in diesem Dokument können jederzeit ohne Vorankündigung geändert werden und stellen keine Verpflichtung seitens des Herstellers oder Verkäufers bzw ein...

Page 16: ...irca 10 minuti Chip IEF Chip PAGE Soluzione di reidratazione Soluzione di DTT Anfolita 3 Preparare la soluzione di reidratazione alla concentrazione di lavoro per la reidratazione del chip IEF e per l estrazione diluizione del campione di proteine Reagenti Volume Concentrazione finale Soluzione di reidratazione 189 µL Soluzione di DTT 1M 10 µL 50 mM Anfolita 1 2 µL 0 5 1 v v Totale 200 µL sceglier...

Page 17: ...to del catodo del chip 3 Sciacquare delicatamente con acqua distillata i pozzetti per il tampone dell anodo e del catodo Utilizzando una salviettina di carta asciugare la parte superiore del chip stando attenti a non danneggiare la sottile striscia di gel situata sul lato del catodo Inserire i chip nel vassoio Sul touchscreen del dispositivo Auto2D selezionare OPEN OK Apertosi il vassoio posiziona...

Page 18: ...itivo fosse presente della condensa prima di spegnere l alimentazione lasciare aperto il vassoio per farlo asciugare Smaltimento I componenti entrati in contatto con i campioni devono essere smaltiti come rifiuti biologici Gli altri materiali vanno smaltiti nel rispetto delle normative vigenti internazionali statali regionali e locali Fare riferimento alla scheda di sicurezza dei componenti per in...

Page 19: ...膨潤およびタンパク質試料の抽出希釈のためのワーキングRehydration solutionを調製します試薬体積最終濃度 Rehydration Solution 189 µL DTT Solution 1M 10 µL 50 mM アンフォライト両性電解質 1 2 µL 0 5 1 v v 合計 200 µL アンフォライトはIEF ChipのpH範囲に合わせて選んでください 40 原液のアンフォライトは 1µLを加えてください 100倍濃度のアンフォライトは2µLを加えてください 4 SDS PAGE前のタンパク質の平衡化用にワーキングEquilibration Bufferを調製してください試薬体積最終濃度 Equilibration Buffer Premix 760 µL DTT Solution 1M 40 µL 50 mM 合計 ...

Page 20: ...陽極側を手前にして置きます Solution Chip 濃青色のラインをPAGE Chipの上に角の取れた側を手前にして置きます溶液の注入 7 6 5 1 2 4 a b c 3 3 1 Cathode Buffer 4500 µL 2 Anode Buffer 4000 µL 3 蒸留水 4000 µL 4 ワーキングEquilibration Buffer a 700 µL b 700 µL オプション c 700 µL オプション 5 ワーキングRehydration solution 100 µL 6 試料 10 12 µL 7 分子量マーカー 0 5 0 7 µL SDSまたはブロモフェノールブルーを含有するものは使えません Electrode Chipをセットする 1 2 1 Electrode ChipのIEF電極部分とSolution Chipの IEF溝を合わせ...

Page 21: ...の想定使用目的に対する適切性をお客様自身が確認する責任を解くものではありません本文書の情報は予告なしに変更されることがあり製造または販売会社またはその関連会社による言質として解釈されるべきものではありません弊社は本書内にいかなる誤りがあってもこれに責任を負いませんお問い合わせ先お近くのオフィスの所在地は次でご覧下さい SigmaAldrich com offices 技術サポート弊社ウェブサイトの技術サービスのページはこちらです SigmaAldrich com techservice 標準保証本文書記載の製品に適用される保証については SigmaAldrich com termsをご覧ください中文 Chinese 预期用途 Auto2D 电泳设备使2D电泳过程完全自动化基于等电点和分子量来分离蛋白质它只需两个小时即可完成蛋白质的完全分离目录 A...

Page 22: ...C 以上量化蛋白质可以加载0 1 25 µg的蛋白质进行2D电泳最佳蛋白质量取决于检测方法和样品复杂性应将以下蛋白质量作为起点用户可能需要优化其特定样品的上样量考马斯亮蓝染色 25 µg 荧光染色 10 µg 银染 5 µg 荧光预标记 3 µg 应用于设备的样品量为10 12 µL 必要时可用工作复水溶液稀释样品接通Auto2D 设备的电源选择与您所在国家地区的电源插座兼容的适当电源线设备随附将匹配的一端牢固地插入Auto2D 设备的背面将另一端牢固地插入电源插座电源开关位于Auto2D 设备背面的交流插口旁边向上按开关打开电源应用程序将自动启动在屏幕上选择Auto2D 型原始型加载配方选择 SETTING 设置 RECIPE 配方按配方信息屏幕这时将出现配方选择对话框选择 RECIPE NAME 配方名称 LOAD 加载 OK...

Page 23: ...记凝胶的方向这将有助于您在凝胶中找到碱性和酸性侧以及高低分子量侧见下图高分子量低分子量酸性碱性清理使用后立即用蒸馏水清洁电极芯片并晾干关闭电源选择菜单退出应用确定关闭系统操作系统确定关闭Auto2D设备背面的开关说明如果在设备内部观察到冷凝水请在关闭电源之前先将托盘打开一段时间以使内部干燥弃置接触过样品的部件应作为生物废物加以处置其他材料应根据适用的国际联邦州和地方法规进行处置有关危害信息请参阅部件的安全数据表声明我们尽我们的所知与所能向客户提供关于应用技术与法规问题的信息和建议但恕不承担任何责任和义务我们的客户在任何情况下都须遵守现行法律和法规这也同样适用于任何第三方权利我们的信息和咨询意见并不能减少我们客户对于检查我们的产品是否符合他们自己需求的责任本文件中的信息可能会有所变更恕不另行通知 ...

Page 24: ...E 칩 재수화 용액 DTT 용액 양성전해질 3 IEF 칩 그리고 단백질 시료의 추출 희석을 위해 작업용 재수화 용액을 준비합니다 시약 용적 최종 농도 재수화 용액 189 µL DTT 용액 1M 10 µL 50 mM 양성전해질 1 2 µL 0 5 1 v v 총 200 µL 사용될 IEF 칩의 범위에 따라 양성전해질 선택 40 w v 저장 농도의 양성전해질은 1 µL 추가 100X의 양성전해질은 2 µL 추가 4 SDS PAGE 이전에 집중화된 단백질의 평형을 위한 작업 평형 완충액 준비합니다 시약 용적 최종 농도 평형 완충액 프리믹스 760 µL DTT 용액 1M 40 µL 50 mM 총 800 µL 시료 준비 단계 3에 따라서 작업용 재수화 용액에 단백질 시료를 용해하십시오 작업용 재수화 용액으로 시료를 2...

Page 25: ... 터치스크린에서 OPEN OK를 선택합니다 트레이가 열린 후 PAGE 칩 연청색 선 을 양극 면이 전면에 가도록 배치합니다 용액 칩 진한 청색 선 을 절단된 모서리가 전면으로 가도록 PAGE 칩 상단에 놓습니다 용액 적용 7 6 5 1 2 4 A b C 3 3 1 음극 완충액 4500 µL 2 양극 완충액 4000 µL 3 증류수 4000 µL 4 작업용 평형 완충액 a 700 µL b 700 µL 선택사항 c 700 µL 선택사항 5 작업용 재수화 용액 100 µL 6 시료 용액 10 12 µL 7 분자량 표지자 0 5 0 7 µL SDS 또는 Bromophenol Blue를 포함 못 함 전극 칩 배치 1 2 1 전극 침의 IEF 전극 부분 그리고 용액 칩의 IEF 칩 홈 2 표식이 전면에 오도록 전극 칩...

Page 26: ...보 및 권고사항은 예상된 목적을 위해 자사 제품의 적합성을 확인해야 하는 자사 고객 자신의 책임을 면제하지는 않습니다 본 문서에 실린 정보는 사전 고지 없이 변경될 수 있으며 제조사 또는 판매사 또는 자회사에서 본 정보를 보장하는 것으로 해석될 수 없습니다 자사는 본 문서에 나타날 수 있는 일체의 오류에 대해 책임지지 않습니다 연락 정보 귀하 부근의 사무실 위치를 위해 SigmaAldrich com offices를 방문하십시오 기술적 지원 SigmaAldrich com techservice에서 기술 서비스를 방문하십시오 기본 보증 본 출판물에 수록된 해당 제품에 적용되는 보증 내용은 SigmaAldrich com terms에 실려 있습니다 Product Ordering Purchase online at Si...

Page 27: ... affiliates All other trademarks are the property of their respective owners Detailed information on trademarks is available via publicly accessible resources 2021 Merck KGaA Darmstadt Germany and or its affiliates All Rights Reserved The life science business of Merck operates as MilliporeSigma in the U S and Canada ...

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