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20424817 Rev 06/21
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Korean
Korean
한국어 (
Korean)
사용 용도
Auto2D
®
전기영동 기기는 2D 전기영동 과정을 완전히
자동화하여, 일차로 등전점 그리고 이차로 분자량으로
단백질을 분리합니다. 완전한 단백질 분리는 2시간 정도
소요됩니다.
내용물
•
Auto2D
®
전기영동 기기
•
전기 전원 케이블:
•
일본 및 북미용 전원 케이블
•
일본 및 북미용 3P-2P 전환 플러그
•
유럽용 전원 케이블
•
중국용 전원 케이블
•
영국용 전원 케이블
필요품(미포함)
카탈로그 번호는 51페이지의 제품 주문을 참조하십시오.
•
Auto2D
®
전극 칩
•
Auto2D
®
PAGE 칩
•
Auto2D
®
IEF 칩
•
Auto2D
®
용액 칩
•
Auto2D
®
Tris-Glycine 또는 Tris-Tricine 시약 키트
•
양성전해질(IEF 칩 pH 범위를 근거로 적절한
양성전해질 선택)
•
증류수
사용자 지침서 온라인
전체 사용자 설명서에는 자세한 지침과 레시피가 포함되어
있습니다. 이는
SigmaAldrich.com
에서 Auto2D
®
기기
제품 페이지에서 다운로드할 수 있습니다.
저장 및 안정성
Auto2D
®
기기는 실내에서만 사용/저장되어야 합니다.
저장 요건은 각 구성품의 제품 라벨을 보십시오.
Y
Y
주의사항
연구용으로만 사용.
본 제품 사용 이전에 안전성 자료(포함) 및
에서 완전한 사용자 지침서를
열람하십시오.
Auto2D
®
작업공정
총 과정: 100–155분(제조법에 따름)
시료 준비 불순물 제거
시약의 추가
시료 적재 및 젤 재수화
일차원:
등전 집중화
SDS 평형
이차원:
SDS-PAGE
검출
30분
5분
30분
30분
5분
준비
시약
1. 해당 키트와 함께 제공된 문헌 또는 완전한 사용자
지침서(온라인)에 지시된 대로 시약 키트를 준비 및
저장합니다.
2. 저온에 저장된 다음 제품이 실온에서 평형이 되도록
허용하십시오.
•
IEF 칩
•
PAGE 칩
•
재수화 용액
•
DTT 용액
•
양성전해질
3. IEF 칩 그리고 단백질 시료의 추출/희석을 위해
작업용 재수화 용액을 준비합니다.
시약
용적
최종 농도
재수화 용액
189 µL
DTT 용액(1M)
10 µL
50 mM
양성전해질*
1–2 µL
0.5–1% v/v
총
200 µL
* 사용될 IEF 칩의 범위에 따라 양성전해질 선택.
40% w/v 저장 농도의 양성전해질은, 1 µL 추가.
100X의 양성전해질은, 2 µL 추가.
4. SDS-PAGE 이전에 집중화된 단백질의 평형을 위한
작업 평형 완충액 준비합니다.
시약
용적
최종 농도
평형 완충액
프리믹스
760 µL
DTT 용액(1M)
40 µL
50 mM
총
800 µL
시료 준비
단계 3에 따라서, 작업용 재수화 용액에 단백질 시료를
용해하십시오. 작업용 재수화 용액으로 시료를 2배 이상
희석하여 원하는 단백질 농도를 얻어 염 농도를 감소할
수 있습니다.
높은 염 농도는 등전 집중화 중에 단백질 분리에 영향을
주어 전류가 100 µA를 초과하도록 유발할 수 있습니다.
고농도 염을 가진 시료는 다음 중 하나로 탈염되어야
합니다.
작업용 재수화 용액에서 단백질의 TCA/ 아세톤 침전
및 재부유
또는
스핀 컬럼을 이용한 완충액 교환
참
고사항: 단백질 재부유 중, 37 °C를 초과하여 단백질을
가열하지 말 것.
단백질 정량. 0.1–25 µg 사이의 단백질을 2D 전기영동을
위해 적재할 수 있습니다. 단백질의 최적 용량은 검출법
및 시료 복잡성에 달려 있습니다. 다음 단백질 용량은
시작점일 뿐이며, 사용자는 특정 시료에 대한 적재량을
최적화해야 합니다.
•
Coomassie Brilliant Blue 염색: 25 µg
•
형광 염색: 10 µg
•
실버 염색: 5 µg
•
형광 사전표지법: 3 µg
기기에 적용되는 시료 용적은 10–12 µL입니다. 시료는
필요에 따라서 작업 재수화 용액으로 희석될 수 있습니다.
Auto2D
®
기기 전원 공급
귀하 국가의 전원 콘센트와 호환되는 적절한 전원 코드(해당
기기와 함께 제공됨)를 선택하십시오. Auto2D
®
기기 후면에
상응하는 끝을 단단히 밀어 넣고 다른 끝부분을 전원 콘센트
끼우십시오.
전원 스위치는 Auto2D
®
기기의 후면 AC 플러그 포트 옆에
위치합니다. 스위치를 눌러 전원을 켜십시오.
애플리케이션이 자동으로 시작됩니다. 스크린에서,
Auto2D
®
모드(오리지널)를 선택하십시오.