B60231–AE
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Stem-Trol Control Cells
IM3632
Para uso em diagnóstico
in vitro
USO PREVISTO
As células de controle Stem-Trol são um produto de controle de qualidade testado para a análise de
imunofenotipagem utilizando reagentes de anticorpos monoclonais CD45 e/ou CD34 e citometria de fluxo. Ele
fornece um controle de células positivo que é processado da mesma maneira que um espécime de sangue
quando células de controle Stem-Trol são adicionadas em uma amostra de sangue total periférico. Isso permite a
verificação do desempenho do reagente e dos métodos utilizados para coloração de células-alvo (ou seja, células
progenitoras hematopoiéticas [HPC] CD34+), lise de eritrócitos e análise de amostras com citometria de fluxo.
Consulte o folheto informativo dos reagentes Stem-Kit (Ref. IM3630) para obter instruções completas caso esteja
realizando análise manual. Consulte o stemCXP System Guide (Guia do sistema stemCXP) fornecido com o
software do sistema stemCXP para obter instruções completas se estiver usando a análise automatizada.
SUMÁRIO
A análise de imunofenotipagem usando citometria de fluxo envolve a identificação e a enumeração de células-alvo
em espécimes biológicos. Os espécimes de interesse são corados com anticorpos monoclonais e os eritrócitos
são lisados antes da análise de citometria de fluxo. É necessário um controle celular positivo para verificar o
desempenho dos reagentes, os métodos de preparação da amostra e os procedimentos de coloração (1). Um
controle celular positivo deve imitar uma célula-alvo representativa em termos de desempenho de anticorpos
monoclonais, lise de eritrócitos e análise de citometria de fluxo.
As células de controle Stem-Trol são uma preparação líquida de células derivadas de KG-1a estabilizadas que
têm expressão de antígeno e propriedades de coloração de CD45 e CD34 representativas das encontradas nas
HPC CD34+.
PRINCÍPIO
As células de controle Stem-Trol são células KG-1a preservadas que foram modificadas e estabilizadas
para expressar epítopos CD34 de classe III (2) e o antígeno comum de leucócitos CD45 em densidades
que se aproximam das células hematopoiéticas humanas imaturas normais.
Uma mistura de células de
controle Stem-Trol adicionada em sangue total normal fresco primeiramente é corada com os reagentes de
anticorpos monoclonais e o corante de viabilidade 7-AAD e posteriormente é lisada para remover os eritrócitos.
Fluoroesferas Stem-Count ou Flow-Count são adicionadas para a determinação direta de contagens absolutas. A
análise de citometria de fluxo da preparação corada e lisada determina a contagem absoluta das células-alvo. Os
resultados esperados são determinados ao usar os reagentes Stem-Kit em sistemas de citômetro de fluxo FC 500
padronizados e validados, equipados com o software do sistema CXP (versão 2.0) para analisar as amostras.
REAGENTES
As células de controle Stem-Trol são suspensas em uma solução isotônica contendo estabilizadores e BSA. A
concentração de células testadas (células/µL) é derivada de múltiplas análises em replicata usando o método de
referência. O valor específico está localizado no rótulo do frasco.
AVISOS E PRECAUÇÕES
1. Os espécimes, as amostras e todo material em contato com os mesmos devem ser tratados como suscetíveis
de transmitir infecções, e devem ser descartados com as devidas precauções.
2. Nunca pipete com a boca, e evite o contato de espécimes ou reagentes com a pele e as mucosas.
3. Não utilize o reagente após a data de validade indicada no rótulo do frasco.
4. Não congele os reagentes.
5. Não exponha o reagente ao calor durante o armazenamento ou o uso.
6. Evite a evaporação e o vazamento do reagente fechando bem os frascos após o uso; caso contrário podem
ocorrer resultados errôneos.
7. As células de controle Stem-Trol irão se depositar em períodos prolongados. Garanta que as células estão
completamente ressuspensas antes da utilização. Evite a mistura excessiva para minimizar a formação de
bolhas de ar. Não pipete bolhas de ar; caso contrário podem ocorrer resultados errôneos.
8. Use uma pipeta calibrada de deslocamento positivo ou de repetição para dispensar as amostras e as células
de controle Stem-Trol; caso contrário, podem ocorrer resultados errados.
