B60231–AE
16 of 128
Stem-Trol-Kontrollzellen
IM3632
In-vitro
-Diagnostikum
VERWENDUNGSZWECK
Stem-Trol Control Cells stellen ein Assay-Qualitätskontrollprodukt für die Analyse zur Immunphänotypisierung mit
CD45- und/oder CD34-monoklonalen Antikörper-Reagenzien und Durchflusszytometrie dar. Es liefert eine positive
Zellkontrolle, die auf gleiche Weise wie eine Blutprobe verarbeitet wird, wobei die Stem-Trol Control Cells in eine
vollumfängliche Blutprobe eingeimpft werden. Dies ermöglicht die Überprüfung der Reagenzienleistung und der für
die Einfärbung der Zielzellen verwendeten Methoden (d. h. CD34+ Hematopoietic Progenitor Cells (blutbildende
Stammzellen), HPC), die Lysierung von Erythrozyten und die Analyse von Proben mit der Durchflusszytometrie.
Siehe Packungsbeilage zu den Stem-Kit Reagents (REF IM3630) für vollständige Anweisungen zur Durchführung
einer manuellen Analyse. Eine vollständige Anleitung bei Verwendung der automatisierten Analyse ist im stemCXP
System Guide (System-Handbuch) der stemCXP-Systemsoftware enthalten.
ZUSAMMENFASSUNG
Die Analyse zur Immunphänotypisierung mit der Durchflusszytometrie umfasst die Identifizierung und
Aufzählung gezielter Zellen in biologischen Proben.
Die interessanten Proben werden vor der Analyse mit
dem Durchflusszytometer mit monoklonalen Antikörpern und Erythrozyten lysiert. Eine positive Zellkontrolle ist
erforderlich, um die Leistung des Reagenzes, die Methoden der Probenvorbereitung und die Einfärbungsverfahren
zu bestätigen (1). Eine positive Zellkontrolle muss eine repräsentative Zielzelle hinsichtlich der monoklonalen
Antikörperleistung, der Lysierung der Erythrozyten und der Analyse mit dem Durchflusszytometer imitieren.
Stem-Trol Control Cells sind eine flüssige Vorbereitung stabilisierter, von KG-1a abgeleiteter Zellen mit
Antigen-Ausdruck sowie CD45- und CD34-Verfärbungseigenschaften, die repräsentativ für die bei CD34+ HPC
gefundenen sind.
PRINZIP
Stem-Trol Control Cells sind konservierte KG-1a-Zellen, die modifiziert und stabilisiert wurden, um die CD34
Klasse III-Epitope (2) und das allgemeine CD45-Leukozyten-Antigen bei Dichtigkeiten von annähernd normalen
unreifen menschlichen blutbildenden Zellen wiederzugeben. Eine Mischung aus Stem-Trol Control Cells, die
in normales, frisches Vollblut eingeimpft wurden, wird zuerst mit den monoklonalen Antikörper-Reagenzien
und 7-AAD Viability Dye-Vitalitätsfarbstoff eingefärbt und anschließend lysiert, um die Erythrozyten zu
entfernen. Stem-Count oder Flow-Count Fluorospheres werden für die direkte Bestimmung der Absolutzahlen
hinzugefügt. Die Analyse der eingefärbten und lysierten Vorbereitung mit dem Durchflusszytometer bestimmt die
Absolutzahl der Zielzellen. Die erwarteten Ergebnisse werden mit Stem-Kit Reagents mithilfe von geprüften und
standardisierten FC 500-Durchflusszytometersystemen mit CXP-Systemsoftware (Version 2.0) zur Analyse der
Proben ermittelt.
REAGENZIEN
Stem-Trol Control Cells werden in einer isotonischen Lösung mit Stabilisatoren und BSA gelöst.
Die
Assay-Zellkonzentration (Zellen/µL) leitet sich aus mehreren wiederholten Analysen mit der Referenzmethode
ab. Der spezielle Wert befindet sich auf dem Fläschchenetikett.
WARNUNGEN UND VORSICHTSMASSNAHMEN
1. Probenmaterial und sämtliche mit den Proben in Kontakt kommende Materialien sollten als potentiell
infektiöses Material gehandhabt und mit den entsprechenden anzuwendenden Vorsichtsmaßnahmen
entsorgt werden.
2. Niemals mit dem Mund pipettieren und den Kontakt von Proben oder Reagenzien mit Haut und Schleimhäuten
vermeiden.
3. Kein Reagenz nach Ablauf des auf dem Etikett des Fläschchens angegebenen Haltbarkeitsdatums anwenden.
4. Reagenzien nicht einfrieren.
5. Bei Lagerung oder Verwendung die Reagenzien nicht der Wärme aussetzen.
6. Die Fläschchen nach der Verwendung mit Kappen fest verschließen, um Verdunstung und Austritt des
Reagenzes zu vermeiden; anderenfalls können fehlerhafte Ergebnisse die Folge sein.
7. Stem-Trol Control Cells setzen sich nach einem längeren Zeitraum ab. Vor dem Gebrauch müssen Zellen
vollständig resuspendiert werden.
Zu starkes Vermischen ist zu vermeiden, um die Blasenbildung zu
reduzieren. Keine Luftblasen pipettieren, sodass keine falschen Ergebnisse erzielt werden.
