B59380–AD
90 of 135
Спецификации
Лизирующий раствор VersaLyse Lysing Solution, готовый к
употреблению
Форма выпуска
Жидкость
Объем
100 мл
Число флаконов
1 флакон
Объем на одно
определение
1 мл (готов к употреблению, если используется в методах, не
предусматривающих одновременной фиксации)
VersaLyse
Лизирующий раствор
1 мл / определение, A09777 100
определений; 100 мл
Применять только для диагностики
in vitro
НАЗНАЧЕНИЕ
Данный реактив предназначен для лизиса эритроцитов в ходе подготовки биологических образцов к
анализу методом проточной цитометрии.
VersaLyse совместим со всеми типами цитометров и может
использоваться как с отмывкой после инкубации, так и без отмывки, если в протокол исследования
предусматривает окрашивание должным образом откалиброванными антителами.
Образцы можно
обрабатывать реактивом VersaLyse, даже если они ранее подвергались отмывке, например, с целью
удаления сывороточных иммуноглобулинов (1,2,3,4,5).
ПРИНЦИП
Образец, содержащий эритроциты, подлежащие лизису, приводят во взаимодействие с реактивом
VersaLyse по крайней мере на 10 минут.
Основным активным ингредиентом реактива VersaLyse
является циклический амин; в присутствии карбоангидразы эритроцитов он превращается в соединение,
обладающее высокой литической активностью в отношении этих клеток.
Реактив можно использовать при работе с конъюгатами специфических анител, связывающихся с
лейкоцитами через экспрессированные этими клетками антигенные детерминанты.
Специфическая
окраска лейкоцитов осуществляется путем инкубации образца с антителом или антителами. После этого
эритроциты лизируют, а лейкоциты, на которые процесс лизиса не оказывает воздействия, анализируют
методом проточной цитометрии.
Образцы необходимо хранить при температуре от 2 до 8°C и быстро анализировать с помощью проточной
цитометрии.
Если анализ откладывается на несколько часов, препараты можно зафиксировать ФСБ,
содержащим 0,1% формальдегида (приготовление этого буфера описано в инструкции, прилагаемой
к фиксирующему раствору IOTest 3 Fixative Solution – Ref.
A07800).
В этом случае необходима
предварительная отмывка.
Проточный цитометр измеряет рассеивание света клетками и их флуоресценцию.
Он позволяет
устанавливать границы целевой популяции клеток внутри электронного окна, задаваемого на гистограмме,
которая соотносит рассеивание света под прямым углом (боковое рассеивание - Side Scatter или SS) с
рассеиванием света под малым углом (прямое рассеивание - Forward Scatter или FS). На этапе гейтинга
можно воспользоваться и другими гистограммами, которые содержат по два различных параметра,
измеряемых цитометром, в зависимости от приложения, избранного пользователем.
Флуоресценция ограниченной популяции клеток анализируется, чтобы отличить положительно окрашенные
события от неокрашенных. Результаты выражают в виде доли флуоресцирующих клеток в процентах от
общего числа событий, зарегистрированных при помощи гейтинга.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1. Не используйте реактив после истечения срока годности.
2. Не храните в холодильнике, не замораживайте.
3. При инкубации с флуоресцирующими антителами минимизируйте воздействие света.
4. Избегайте микробного загрязнения реактивов во избежание ложных результатов.