B59380–AD
85 of 135
Spesifikasyonlar
Kullanıma Hazır VersaLyse Parçalama Çözeltisi
Formülasyon
Likid
Hacim
100 mL
Flakon sayısı
1 flakon
Test başına Hacim
1 mL (konkomitant sabitleme ile birlikte kullanılmadığında kullanıma
hazırdır)
VersaLyse
Parçalama Çözeltisi
1 mL / test, A09777 100 test; 100 mL
İn Vitro
Diagnostik Kullanım için
KULLANIM AMACI
Bu reaktif akım sitometrisi analizinde biyolojik numunelerin hazırlanmasında kırmızı kan hücrelerinin parçalanması
içindir.
VersaLyse bütün sitometre tipleri ile uyumludur ve protokolde uygun şekilde kalibre edilmiş floresan
antikorlar kullanıldığı sürece inkübasyondan sonra yıkama yapılarak veya yapılmayarak kullanılır. VersaLyse
örneğin serum immünoglobulinlerinin ortadan kaldırılmasını sağlamak için numuneler daha önceden yıkanmış
bile olsalar numunelerin işleme tabi tutulmasını mümkün kılmaktadır (1,2,3,4,5).
PRENSİP
Parçalanması için kırmızı kan hücreleri içeren numune en az 10 dakika boyunca VersaLyse reaktifine maruz
bırakılır. VersaLyse’ın ana etkin bileşeni, kırmızı kan hücrelerinde karbonik anhidraz ile temas halinde bulunan ve
bu hücreler için oldukça parçalayıcı özelliğe sahip bir bileşiğe dönüşen siklik amindir.
Bu reaktif, eksprese ettikleri antijenik belirleyicilerden dolayı lökositlere bağlanabilen spesifik konjuge antikorlarla
birlikte kullanılır. Lökositlerin spesifik boyanması numunenin antikor veya antikorlar ile inkübe edilmesiyle elde
edilir.
Kırmızı hücreler daha sonra parçalanarak uzaklaştırılır ve bu işlemden etkilenmeyen lökositler akım
sitometrisi ile analiz edilir.
Preparatlar 2 ila 8°C arasında saklanmalıdır ve akım sitometrisi kullanılarak hızla analiz edilmelidir. Analizden
önce birkaç saatlik bir gecikme olması durumunda, %0,1 formaldehit içeren PBS ile sabitlenebilirler (bu PBS’yi
%0,1 formaldehit ile hazırlamak için IOTest 3 Sabitleme Çözeltisinin – Ref. A07800 – teknik prospektüsüne bakın).
Bu durumda, önceden yıkama gereklidir.
Akım sitometrisi ışık diffüzyonunu ve hücrelerdeki floresanı ölçer.
İlgilenilen popülasyonun, ışığın dikey
diffüzyonunu (Side Scatter veya SS) ile dar-açılı ışığın diffüzyonunu (Forward Scatter veya FS) ilişkilendiren
bir histogram üzerinde tanımlanan elektronik pencere içerisinde sınırlandırılmasını mümkün kılar.
Sitometre
üzerinde mevcut farklı parametrelerin ikisini birleştiren diğer histogramlar kullanıcı tarafından seçilen uygulamaya
dayanarak gating (kapılama) aşamasında yardımcı olarak kullanılabilir.
Sınırlandırılan hücrelerdeki floresan pozitif olarak boyanmış olayların boyanmamış olanlardan ayırt edilmesi
amacıyla analiz edilir. Sonuçlar gating ile edinilmiş tüm oranlara kıyasla pozitif olayların yüzdesi olarak gösterilir.
UYARILAR VE ÖNLEMLER
1. Reaktifi son kullanma tarihinden sonra kullanmayın.
2. Buzdolabında saklamayın, dondurmayın.
3. Floresan antikorlarla inkübasyon sırasında ışığa maruz kalmasını en aza indirin.
4. Reaktifleri mikrobiyal kontaminasyondan uzak tutun, aksi takdirde yanlış sonuçlar meydana gelebilir.
5. Formaldehit toksil ve alerjiktir. Kanserojenik olduğu düşünülmektedir. Asla ağızla pipetleme yapmayın ve cilt,
mukoza, gözler ve giysilerle herhangi şekilde temasından kaçının.
6. Tüm kan numunelerinin potansiyel olarak enfeksiyöz olabileceği düşünülmelidir ve bu numuneler dikkatle
kullanılmalıdır (özellikle: koruyucu eldiven, önlük ve gözlüklerin kullanılması).
7. Çalışma sırasında kullanılan kan tüpleri ve tek kullanımlık malzemeler yakma işlemi için tasarlanmış spesifik
kaplarda imha edilmelidir.