B59380–AD
47 of 135
Spesifikasjoner
VersaLyse Lysingsløsning Klar for bruk
Formulering
Væske
Volum
100 mL
Antall glass
1 glass
Volum per test
1 mL (bruksklar når den brukes uten medvirkende fiksering)
Lysingsløsning
Lysing Løsning
.
1 mL/test, A09777
100 tester; 100 mL
Til
In Vitro
diagnostisk bruk
ANVENDELSESOMRÅDE
Denne reagensen er ment for lysering av røde blodceller i fremstillingen av biologiske prøver for
flowcytometri-analyse. VersaLyse er kompatibel med alle typer cytometere og brukes med eller uten vasking
etter innkubering, så lenge riktig kalibrerte fluorescente antistoffer bruke i protokollen.
VersaLyse gjør det
også mulig å behandle prøver selv når de har blitt vasket tidligere, for å eliminere serumimmunoglobuliner for
eksempel (1,2,3,4,5).
PRINSIPP
Prøven som inneholder de røde blodcellene som skal lyses eksponeres for VersaLyse-reagensen i minst 10
minutter.
Den viktigste aktive ingrediensen i VersaLyse er en syklisk amin som, i kontakt med karboniske
anhydrase som finnes i røde blodceller, transformeres til en blanding som er svært lytisk for disse cellene.
Denne reagensen brukes med spesifikke konjugerte antistoffer som kan binde leukocytter på grunn av de
antigeniske determinantene de uttrykker. Den spesifikke fargingen av leukocytter oppnås ved å inkubere prøven
med antistoffet eller antistoffene. De røde cellene fjernes deretter ved lysis og leukocyttene, upåvirket av denne
prosessen, analyseres med flow-cytometri.
Preparater må oppbevares mellom 2 og 8 °C og analyseres raskt ved bruk av flow-cytometri. Ved en forsinkelse
på flere timer før analyse, kan de fikseres med PBS som inneholder 0,1 % formaldehyd (se det tekniske bladet for
IOTest 3 Fikserløsning – Ref. A07800 – for å fremstille denne PBSen med 0,1 % formaldehyd). I dette tilfellet er
det nødvendig å vaske først.
Flow-cytometeret måler lysdiffusjonen og fluorescensen til cellene.
Dette muliggjør begrensningen av den
interessante populasjonen innen det elektroniske vinduet som er definert på et histogram, som korrelaterer den
rettvinklede diffusjonen av lys (sidespredning eller SS) og diffusjonen av smalvinklet lys (Frem-spredning eller
FS). Andre histogrammer som kombinerer to av de forskjellige parametrene som er tilgjengelige på cytometeret
kan brukes som støtte i utløsingfasen, avhengig av bruksområdet som er valgt av brukeren.
Fluorescensen av de avgrensede cellene analyseres for å kunne skille de positivt fargede hendelsene fra de
ufargede. Resultatene uttrykkes som en prosentandel av positive hendelser i forhold til alle hendelsene som skjer
på grunn av utløsingen.
ADVARSEL OG FORHOLDSREGLER
1. Reagensen må ikke brukes etter utløpsdatoen.
2. Ikke oppbevar i kjøleskap, ikke frys.
3. Minimer eksponeringen for lys i løpet av inkubasjonen med fluorescente antistoffer.
4. Unngå mikrobiell kontaminering av reagensene, hvis ikke kan falske resultater oppstå.
5. Formaldehyd er giftig og allergenisk. Den anses som en karsinogenisk agent. Pipetter aldri med munnen og
unngå all kontakt med hud, slimhinner, øyne og klær.
6. Alle blodprøver må vurderes som potensielt smittefarlige og må behandles med varsomhet (dette gjelder
spesielt: bruk av beskyttende hansker, klær og briller).
7. Blodrør og engangsmateriale som brukes for håndtering skal kasseres i ad hoc-kontainere som er ment for
brenning.