B59380–AD
117 of 135
Specifikacije
Pripremljeni VersaLyse rastvor za liziranje
Formulacija
Tečno
Zapremina
100 ml
Broj bočica
1 bočica
Zapremina po testu
1 ml (pripremljen kada se koristi bez istovremene fiksacije)
VersaLyse
Rastvor za liziranje
.
1 ml / testu, A09777
100 testova; 100 ml
Za
in vitro
dijagnostičku upotrebu
NAMENA
Ovaj reagens je namenjen za liziranje eritrocita u pripremi bioloških uzoraka za analizu protočnom citometrijom.
VersaLyse rastvor je kompatibilan sa svim tipovima citometara i koristi se sa ili bez pranja nakon inkubacije, sve dok
se u okviru protokola koriste pravilno kalibrisana fluorescentna antitela. VersaLyse takođe omogućava tretiranje
uzoraka čak i kada su prethodno isprani, na primer, u cilju eliminacije serumskih imunoglobulina (1,2,3,4,5).
PRINCIP
Uzorak koji sadrži eritrocite predviđen za liziranje izlaže se dejstvu reagensa VersaLyse u trajanju od najmanje 10
minuta. Glavni aktivni sastojak VersaLyse je ciklični amin koji se u dodiru sa ugljenom anhidrazom, koja postoji u
eritrocitima, transformiše u jedinjenje koji je veoma litičko za ove ćelije.
Ovaj reagens se koristi sa specifičnim konjugovanim antitelima koja se mogu vezivati za leukocite usled
antigenskih determinanti koje eksprimiraju.
Specifično bojenje leukocita postiže se inkubiranjem uzorka sa
antitelom ili antitelima. Eritrociti se zatim uklanjaju liziranjem a leukociti, na koje ovaj proces ne utiče, se analiziraju
protočnom citometrijom.
Preparati se moraju čuvati na temperaturi između 2 i 8°C i brzo analizirati protočnom citometrijom. U slučaju
odlaganja od nekoliko sati pre analize, preparati se mogu fiksirati PBS-om koji sadrži 0,1% formaldehid
(pogledajte tehničko uputstvo za IOTest 3 fiksativni rastvor – REF.A07800 – da biste pripremili ovaj PBS sa 0,1%
formaldehidom). U ovom slučaju je neophodno prethodno pranje.
Protočni citometar meri difuziju svetlosti i fluorescenciju ćelija. On omogućava razgraničenje populacije od interesa
u okviru elektronskog prozora definisanog na histogramu, što je u korelaciji sa ortogonalnom difuzijom svetlosti
(bočno rasejanje ili SS) i difuzijom uskougaone svetlosti (prednje rasejanje ili FS). Drugi histogrami koji kombinuju
dva različita parametra koja postoje na citometru mogu se koristiti kao pomoć u fazi regulacije, u zavisnosti od
primene koju je korisnik odabrao.
Fluorescencija ograničenih ćelija se analizira kako bi se razlikovali pozitivno obojeni događaji od neobojenih
događaja.
Rezultati su prikazani kao procenat pozitivnih događaja u odnosu na sve događaje dobijene
regulacijom.
UPOZORENJE I MERE OPREZA
1. Ne koristite reagens nakon roka trajanja.
2. Ne čuvati u frižideru, ne zamrzavati.
3. Smanjite izlaganje svetlosti tokom inkubacije sa fluorescentnim antitelima.
4. Izbegavajte mikrobiološku kontaminaciju reagensa, jer to može dovesti do netačnih rezultata.
5. Formaldehid je otrovan i alergen. Smatra se da je on karcinogen. Pipetiranje nikada ne vršite ustima i
izbegavajte sav kontakt sa kožom, sluzokožom, očima i odećom.
6. Svi uzorci krvi moraju se smatrati potencijalno infektivnim i njima se mora pažljivo rukovati (naročito: nošenje
zaštitnih rukavica, ogrtača i naočara).
7. Epruvete za krv i i potrošni materijal za rukovanje treba odložiti u ad hok kontejnere koji se koriste za spaljivanje
otpada.